納米金生物探針及硫化銅膜在生物傳感器中的一些應用.pdf

1、納米粒子由于其特有的性質及巨大應用前景，已成為科學研究的熱點。近年來，納米技術逐步進入生物傳感器領域，為生物傳感器的發(fā)展提供了無窮的想象?？偟恼f來，納米顆?？梢詮V泛地應用于敏感分子的固定，信號的檢測和放大，待測物質的富集和濃縮。本文首先研究了利用金納米粒子標記寡核苷酸和羊抗人免疫球蛋白G(IgG)生物探針分別檢測了單堿基突變和人IgG，最后研究了基于硫化銅納米膜的電容型免疫傳感器。具體內容包括以下幾個方面： 第一部分：提出了一種

2、基于自組裝和使用金標抗體和絡合物雙重放大檢測信號的方法提高壓電免疫傳感器的靈敏度。通過自組裝方法在石英晶體微天平(QCM)的金電極表面組裝一層葡萄糖球菌蛋白A(PA)，再在生成的膜上面組裝一層羊抗人IgG充當傳感界面。在傳感界面與人IgG反應后，分別利用金標抗體和免疫絡合物作為一級放大標記物和二級放大標記物雙重放大人IgG的檢測信號。為了提高靈敏度，對絡合物的組成和金標抗體的稀釋倍數(shù)進行了優(yōu)化。實驗結果表明該傳感器能在10.9ng/mL

3、～10.9μg/mL范圍內對人IgG進行測定。與傳統(tǒng)的壓電免疫分析比較，這種質量放大方法的靈敏度和檢測下限均有較大提高。 第二部分：設計一鎖掛探針檢測結直腸癌相關的K—碎片基因密碼子12的單堿基突變。只有與目標鏈完全匹配時，鎖掛探針才能被大腸桿菌連接酶連接。環(huán)化的鎖掛探針和用引物與之雜交后，通過φ29聚合酶延伸引物得到由與鎖掛探針互補的堿基單元組成的DNA單鏈，最后利用13nm納米金顆粒標記的巰基化寡核苷酸與RCA產物雜交后，通