替米沙坦改善高脂飼養(yǎng)OLETF大鼠胰島素抵抗并調節(jié)大鼠循環(huán)脂肪細胞因子水平.pdf

1、目的：探討血管緊張素Ⅱ1型受體(angiotensinⅡtype1receptor，AT1R)拮抗劑替米沙坦對高脂喂養(yǎng)OLETF(otsukalong-evanstokushimafatty，OLETF)大鼠2型糖尿病(Type2DiabetesMellims，T2DM)的預防作用，以及對大鼠胰島素抵抗和糖脂代謝的影響。觀察替米沙坦對高脂喂養(yǎng)OLETF大鼠循環(huán)脂肪細胞因子水平的調控作用。
　　方法：4周齡雄性OLETF(otsuk

2、along-evanstokushimafatty)大鼠47只，同系同周齡LETO(long-ewanstokushimaotsuka)大鼠12只，體質量為150～200g，均為日本大冢制藥有限公司研究所惠贈，于清潔級環(huán)境以標準飼料適應性飼養(yǎng)4周。OLETF大鼠于8周齡開始給予高脂飼料喂養(yǎng)。至16周齡，進行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)，各組大鼠均未出現(xiàn)糖耐量異常，根據OGTT2h血糖和體重將OLETF大鼠隨機分為5組：①無干預的OLE

3、TF大鼠(IR組)，共10只；②二甲雙胍干預的OLETF大鼠(MET組)，共10只，給予二甲雙胍(100mg·kg-1·d-1)；③吡格列酮干預的OLETF大鼠(P組)，共8只，給予吡格列酮(10mg·kg-1·d-1)；④替米沙坦干預的OLETF大鼠(L組)，共10只，給予替米沙坦(5mg·kg-1·d-1)；⑤低劑量替米沙坦干預的OLETF大鼠(VL組)，共9只，給予替米沙坦(0.5mg·kg-1·d-1)。LETO大鼠(NC組)，

4、共12只。22周齡時再次復查OGTT，全部OLETF大鼠均發(fā)生胰島素抵抗。開始藥物干預共26周，每日1次灌胃，對照組大鼠以等量蒸餾水灌胃，48周齡處死大鼠。觀察：1.體重變化：自20周齡始每兩周稱重一次。2.血清指標：生化法測定血清游離脂肪酸、總膽固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇等代謝指標；葡萄糖氧化酶法測定空腹血糖；ELISA法測定空腹胰島素、血清視黃醇結合蛋白4(Retinol-bindingprotein4，

5、RBP4)、網膜素、內脂素水平。所有結果均采SPSS18.0軟件分析處理。
　　結果：1.各組大鼠2型糖尿病發(fā)病率比較：各組大鼠2型糖尿病發(fā)病率不同，差異有統(tǒng)計學意義(x2=36.501，P=0.000)，且L組與IR組比較有下降趨勢。2.各組大鼠體重比較：自20周齡開始，IR組、MET組、P組、L組和VL組間大鼠體重無明顯差別，但IR組、MET組、P組、L組和VL組體重均明顯高于NC組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。至34周

6、齡開始，L組體重較IR組和MET組有下降趨勢，差異無統(tǒng)計學意義(P值分別為0.809和0.476)；L組體重較P組明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。
　　3.各組大鼠糖脂代謝指標比較：①IR組與NC組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素和HOMA-IR明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.001、0.036、0.000、0.000、0.011和0.000)；ISI明顯降低，差異有統(tǒng)計

7、學意義(P=0.000)。
　?、贚組與IR組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖和HOMA-IR明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.005、0.029、0.000、0.031和0.022)；ISI明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.017)。
　?、踁L組與IR組比較，游離脂肪酸和低密度脂蛋白膽固醇明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.041和0.000)。
　?、躊組與IR組比較，總膽

8、固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖和HOMA-IR明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.004、0.001、0.001和0.001)；ISI明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001)。
　?、軱組與MET組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素和HOMA-IR明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.000、0.039、0.06、0.008和0.006)；ISI明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.004)。

9、　?、轑組與P組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR和ISI比較，差異均無統(tǒng)計學意義。
　　4.各組大鼠循環(huán)脂肪細胞因子水平的比較：①IR組網膜素明顯低于NC組、MET組、L組和VL組，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.000、0.026、0.000和0.006)；內脂素明顯高于NC組、P組、L組和VL組，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.001、0.007、0.002和0.026)；R

10、BP4明顯高于NC組和L組，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.000和0.000)。
　　②L組網膜素明顯高于MET組和P組，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.07和0.024)；內脂素明顯低于MET組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.013)；RBP4明顯低于MET組、P組和VL組，差異有統(tǒng)計學意義(P值分別為0.000、0.006和0.009)。
　　5.脂肪細胞因子水平的直線相關分析：①網膜素與RBP4和內脂素呈負相關(r分別為

11、-0.418和-0.415，均P<0.01)：②內脂素與HOMA-IR、游離脂肪酸和RBP4呈正相關(r分別為0.332、0.270和0.304，均P<0.05)，與ISI和網膜素呈負相關(r分別為-0.316和-0.415，均1<0.05)；③RBP4與空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR、游離脂肪酸和內脂素呈正相關(r分別為0.465、0.400、0.534、0.294和0.304，均P<0.05)，與ISI和網膜素呈負相關(r分別

12、為-0.567和-0.148，均P<0.01)。
　　6.多元線性逐步回歸分析：①以網膜素水平為因變量進行多元線性逐步回歸分析，結果顯示RBP4和內脂素是網膜素水平的獨立影響因素?；貧w方程：Y＾=248.282-0.52XRBP4-0.118Xvisfatin。
　?、谝訰BP4水平為因變量進行多元線性逐步回歸分析，結果顯示ISI和網膜素是RBP4水平的獨立影響因素?；貧w方程：Y^=84.799-10.955XISI-0.1

13、92Xomentin。
　?、垡詢戎厮綖橐蜃兞窟M行多元線性逐步回歸分析，結果顯示HOMA-IR和網膜素是內脂素水平的獨立影響因素?；貧w方程：Y^=645.924-1.008Xomentin+2.371XHOMA-IR。
　　結論：1.通過對OLETF大鼠的早期高脂飼養(yǎng)，成功建立了具有胰島素抵抗及空腹高血糖的T2DM動物模型。
　　2.高脂飼養(yǎng)使OLETF大鼠血清游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空

14、腹胰島素和HOMA-IR明顯升高，ISI明顯降低；同時顯著上調血清RBP4和內脂素水平并下調網膜素水平。
　　3.經過替米沙坦干預，可以改善OLETF大鼠的糖脂代謝紊亂和胰島素抵抗狀態(tài)，降低OLETF大鼠的T2DM發(fā)病率。替米沙坦對OLETF大鼠循環(huán)脂肪細胞因子的表達具有調控作用，可能通過降低血清RBP4和內脂素，提高網膜素的表達改善大鼠胰島素抵抗。
　　4.通過與二甲雙胍和吡格列酮比較，顯示替米沙坦在對大鼠循環(huán)脂肪細胞因子