人心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒的方法學(xué)評(píng)價(jià)及在ACS患者早期危險(xiǎn)分層和預(yù)后評(píng)估中的臨床研究.pdf

1、第一部分：
　　目的:
　　評(píng)價(jià)蘭州生物制品研究所研發(fā)的人心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)ELISA檢測(cè)試劑盒與已批準(zhǔn)上市的同類(lèi)試劑盒用于臨床診斷檢測(cè)性能的等效性及臨床符合性,確定其性能的可接受性。
　　方法:
　　樣本為中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院住院的疑診ACS患者與解放軍305醫(yī)院健康查體人員的血漿或血清,根據(jù)入選標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)共入選2

2、40例樣本,對(duì)蘭州與荷蘭H-FABP試劑盒采用平行、對(duì)照試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè),進(jìn)行方法比較實(shí)驗(yàn),評(píng)價(jià)兩者相關(guān)性,以及對(duì)蘭州H-FABP試劑盒檢測(cè)H-FABP的精密度試驗(yàn)、回收試驗(yàn)、干擾試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)其臨床檢測(cè)性能。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)描述與分析應(yīng)用SPSS13.0軟件包進(jìn)行,兩種試驗(yàn)產(chǎn)品結(jié)果的一致性采用Kappa檢驗(yàn)和相關(guān)分析,采用雙側(cè)檢驗(yàn),認(rèn)為P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　方法比較實(shí)驗(yàn):在可檢測(cè)范圍內(nèi),蘭州與荷蘭

3、試劑盒全自動(dòng)免疫分析儀測(cè)定檢測(cè)H-FABP值的相關(guān)系數(shù)R=0.96,P<0.001,兩者具有良好的相關(guān)性。精密度試驗(yàn):蘭州試劑盒檢測(cè)H-FABP的批內(nèi)變異系數(shù)為5.7％~8.2%,批間變異系數(shù)為3.9%~4.1%?；厥赵囼?yàn):蘭州試劑盒檢測(cè)H-FABP的回收率為93.0%-105.7%。干擾試驗(yàn):不同濃度TBIL對(duì)正常水平的H-FABP的影響度在-9.57%~2.39%;不同濃度TBIL對(duì)異常水平的H-FABP的影響度在-20.71~7.

4、43%。不同濃度TG對(duì)正常水平的H-FABP的影響度在-7.33%~10.13%;不同濃度TG對(duì)異常水平的H-FABP的影響度在5.07~10.93%。不同濃度溶血血紅蛋白對(duì)正常水平的H-FABP的影響度在-9.18%~8.16%;不同濃度溶血血紅蛋白對(duì)異常水平的H-FABP的影響度在-9.27%~9.83%。蘭州試劑盒檢測(cè)H-FABP診斷ACS的靈敏度為91.8%,特異度為88.7%,正確率為90.4%。荷蘭試劑盒檢測(cè)H-FABP診斷

5、ACS的靈敏度為90.3%,特異度為86.8%,正確率為88.8%。采用配對(duì)資料McNamara’s test卡方檢驗(yàn),結(jié)果顯示兩種產(chǎn)品測(cè)定結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)差異(P=0.668,>0.05)。采用Kappa檢驗(yàn),結(jié)果顯示兩種產(chǎn)品的測(cè)定結(jié)果的一致性很好(Kappa=0.726,P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　1、蘭州生物研究所生產(chǎn)的H-FABP與荷蘭HBT公司生產(chǎn)的H-FABP檢測(cè)試劑盒比較,具有良好的相關(guān)性;
　　2

6、、在本實(shí)驗(yàn)人群中,蘭州H-FABP試劑盒診斷ACS的靈敏度、特異度和正確率略高于同類(lèi)上市產(chǎn)品荷蘭HBT公司生產(chǎn)的H-FABP試劑盒。兩組試劑盒診斷ACS的靈敏度、特異度和正確率未顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,兩者比較具有等效性且臨床符合性良好;
　　3、蘭州生物研究所生產(chǎn)的H-FABP檢測(cè)試劑盒的臨床檢測(cè)性能指標(biāo)良好,在臨床上具有推廣應(yīng)用的潛在價(jià)值。
　　第二部分：
　　目的：
　　探討自主研發(fā)的H-FABP試劑盒檢測(cè)ACS患

7、者H-FABP水平,并聯(lián)合檢測(cè)NT-proBNP、CRP、cTnT等心臟標(biāo)志物,評(píng)價(jià)其與ACS患者發(fā)生心血管不良事件之間的關(guān)系,探討聯(lián)合檢測(cè)心臟標(biāo)志物在ACS患者危險(xiǎn)分層及預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法：
　　2010年3月-2012年3月就診于解放軍總醫(yī)院的疑診ACS患者286例,篩選232例明確診斷急性冠脈綜合癥(ACS)者,包括不穩(wěn)定型心絞痛(UA)、非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)以及ST段抬高心肌梗死(STE

8、MI);臨床治療及隨訪(fǎng)資料完整;排除原有腎功能不全、心功能不全、慢性阻塞性肺部疾病以及原有各種結(jié)締組織疾病、感染、外傷、惡性腫瘤患者。胸痛發(fā)作至住院12小時(shí)內(nèi)檢測(cè)ACS患者H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT水平,根據(jù)四分位數(shù)進(jìn)行分組,利用受試者工作特征曲線(xiàn)(receiver operator characteristic curve,ROC曲線(xiàn)),對(duì)H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT四種標(biāo)志物在ACS預(yù)后

9、評(píng)估中的價(jià)值進(jìn)行系列比較,并對(duì)四種標(biāo)志物聯(lián)合評(píng)價(jià)方案在ACS預(yù)后及危險(xiǎn)分層中的價(jià)值進(jìn)行初步探討和分析。
　　結(jié)果：
　　H-FABP在ACS患者中的平均水平為20.98±11.39ng/ml,其預(yù)測(cè)心血管事件的ROC曲線(xiàn)下面積為0.807,其判斷界值為40.97ng/ml。NT-proBNP、CRP和cTnT的ROC曲線(xiàn)下面積稍低,但均大于0.7,因此對(duì)ACS患者心血管事件的發(fā)生均有較好的預(yù)測(cè)作用。隨訪(fǎng)12月時(shí)伴有心血管事件

10、患者的四種標(biāo)志物檢測(cè)水平均明顯高于無(wú)心血管事件組患者。根據(jù)四分位值將四種標(biāo)志物檢測(cè)值由低到高分為四組,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各標(biāo)志物高值組患者心血管事件的發(fā)生率均顯著高于低值組患者,相應(yīng)其無(wú)心血管事件生存率亦明顯低于低值組。COX單因素分析顯示四種心臟標(biāo)志物均與ACS患者心血管事件的發(fā)生明顯相關(guān)。以四種標(biāo)志物各自的截?cái)嘀底鳛殛?yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組,顯示四種標(biāo)志物都陽(yáng)性共有16例,均出現(xiàn)心血管事件,當(dāng)H-FABP陽(yáng)性且其他有兩項(xiàng)標(biāo)志物陽(yáng)性時(shí),有62.5%

11、的患者隨訪(fǎng)可出現(xiàn)心血管事件。當(dāng)H-FABP陽(yáng)性且其他有一項(xiàng)標(biāo)志物陽(yáng)性時(shí),其心血管事件的發(fā)生率有所下降,但仍在30%以上。當(dāng)僅H-FABP陽(yáng)性時(shí),心血管事件的發(fā)生率為23.1%,仍明顯高于四項(xiàng)標(biāo)志物均陰性組,后者心血管事件發(fā)生率僅為4.6%。進(jìn)一步以年齡、性別、高血壓、吸煙、糖尿病、病變血管數(shù)及H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT四種標(biāo)志物為自變量,以將隨訪(fǎng)12個(gè)月時(shí)心血管不良事件為因變量,進(jìn)行Cox多因素回歸分析,結(jié)果顯示

12、,H-FABP、NT-proBNP、CRP、cTnT為ACS患者出現(xiàn)心血管不良事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　結(jié)論：
　　1、H-FABP、NT-proBNP、CRP和cTnT的檢測(cè)水平與ACS患者心血管事件的發(fā)生密切相關(guān),是ACS患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素。
　　2、國(guó)產(chǎn)試劑盒檢測(cè)H-FABP并聯(lián)合NT-proBNP、CRP和cTnT檢測(cè)可更好地對(duì)ACS患者進(jìn)行早期危險(xiǎn)分層,并對(duì)預(yù)后評(píng)估有很好的預(yù)測(cè)價(jià)值。
　　第三部分：

13、
　　目的：
　　探討H-FABP在發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者的危險(xiǎn)分層及預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法：
　　2010年3月-2012年3月就診于解放軍總醫(yī)院并明確診斷急性冠脈綜合癥(ACS)患者,共232例,篩選胸痛發(fā)作至入院6小時(shí)內(nèi)檢測(cè)cTnT為陰性患者55例,同時(shí)檢測(cè)H-FABP水平。并在發(fā)病后12、24、48小時(shí)內(nèi)動(dòng)態(tài)連續(xù)檢測(cè)H-FABP與cTnT水平,觀察H-FABP與cTnT檢測(cè)值的動(dòng)態(tài)變化

14、及相應(yīng)患者病情演變,并繪制H-FABP預(yù)測(cè)發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者演變?yōu)樾募」Ｋ赖腞OC曲線(xiàn),計(jì)算曲線(xiàn)下面積,評(píng)價(jià)H-FABP預(yù)測(cè)發(fā)病早期cTnT陰性患者演變?yōu)樾募」Ｋ赖奶禺惗扰c靈敏度。對(duì)發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者隨訪(fǎng)觀察12個(gè)月,根據(jù)此間是否出現(xiàn)心血管事件分為2組,觀察2組患者在發(fā)病早期H-FABP檢測(cè)水平是否存在差異。采用ROC曲線(xiàn)觀察發(fā)病6小時(shí)內(nèi)H-FABP檢測(cè)水平預(yù)測(cè)發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者心血管事件的曲線(xiàn)

15、面積,并根據(jù)ROC曲線(xiàn)選擇H-FABP值合適的截?cái)帱c(diǎn),據(jù)此分為H-FABP高值組與低值組,觀察2組患者心血管事件發(fā)生情況及無(wú)心血管事件生存率的差異。
　　結(jié)果：
　　出現(xiàn)癥狀6小時(shí)內(nèi)檢測(cè)cTnT為陰性的ACS患者,隨病情進(jìn)展cTnT可逐漸增高,在出現(xiàn)癥狀后12小時(shí)檢測(cè)時(shí)達(dá)峰值,隨后開(kāi)始下降,但仍能維持一定水平,在48小時(shí)可下降約50%。而H-FABP在出現(xiàn)癥狀6小時(shí)內(nèi)即達(dá)峰值,12小時(shí)輕度下降(12.82%),隨后下降較快,

16、48小時(shí)可下降約79%。55例患者有24例在住院期間演變急性心肌梗死,而出現(xiàn)癥狀6小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的H-FABP水平對(duì)發(fā)病早期cTnT陰性的ACS患者演變?yōu)樾募」Ｋ谰哂泻芎玫念A(yù)測(cè)價(jià)值,其ROC曲線(xiàn)下面積為0.946,截?cái)嘀禐?5.47ng/ml,預(yù)測(cè)的靈敏度為87.5%,特異度為90.33%。在隨訪(fǎng)12個(gè)月時(shí)進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)有11例患者出現(xiàn)心血管事件,發(fā)生心血管事件組患者的H-FABP均值明顯高于無(wú)心血管事件組。用ROC曲線(xiàn)分析顯示曲線(xiàn)下面積為

17、0.772,其預(yù)測(cè)心血管事件的截?cái)嘀禐?4.71ng/ml。我們以該截?cái)嘀禐闃?biāo)準(zhǔn),將其分為高值組與低值組,結(jié)果顯示在高值組即高危組患者心血管事件的發(fā)生率為54.5%,而在低值組即低危組患者心血管事件的發(fā)生率僅為11.4%,二者差異顯著。高危組患者無(wú)心血管事件生存率明顯低于低危組(8.55±1.08VS11.23±1.39)。
　　結(jié)論：
　　對(duì)于發(fā)病早期cTnT檢測(cè)陰性的ACS患者,H-FABP是危險(xiǎn)分層與預(yù)后評(píng)估的良好指標(biāo)