藏藥“榜間嘎保”品種整理及主流品種的品質(zhì)研究.pdf

1、藏藥“榜間嘎保”，即白花龍膽，為大宗常用藏藥材，臨床上用于治毒病，各種熱癥，喉炎熱閉。為十五味龍膽花丸、二十五味龍膽花丸等經(jīng)典藏成藥的君材，療效確切。本研究針對(duì)其來源復(fù)雜，分類混亂，現(xiàn)代藏醫(yī)藥學(xué)著作及國(guó)家、地方標(biāo)準(zhǔn)收載的品種不一致，質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)單，缺乏內(nèi)在質(zhì)量評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)，臨床使用缺乏科學(xué)依據(jù)等問題，采用文獻(xiàn)分析、實(shí)地調(diào)查、生藥研究、化學(xué)成分分析、藥效評(píng)價(jià)相結(jié)合的方法，對(duì)藏藥“榜間嘎?！边M(jìn)行了系統(tǒng)的品種整理及主流品種的質(zhì)量研究，得到如下

2、結(jié)果。
　　1、對(duì)白花龍膽進(jìn)行了系統(tǒng)的文獻(xiàn)整理，為其臨床使用及合理的開發(fā)利用提供一手資料。
　　本文首次發(fā)現(xiàn)藏藥“榜間嘎?！弊钤缬涊d于《月王藥診》，更正了藏醫(yī)藥專著《中華本草·藏藥卷》等文獻(xiàn)中有關(guān)其始載于《四部醫(yī)典》的錯(cuò)誤提法。梳理了藏本草及相關(guān)文獻(xiàn)記載做“榜間嘎保”使用的品種，對(duì)其中的品種歸并、命名異議的問題做了分析。最終整理文獻(xiàn)記載的白花龍膽基原植物達(dá)7種，1變種。弄清了印度佛經(jīng)典籍及藏醫(yī)學(xué)對(duì)“榜間嘎?！钡墓πе髦渭坝梅?/p>

3、，并總結(jié)了70余首含白花龍膽的經(jīng)典藏成藥方，有2/3的藏成方臨床上主要用于呼吸系統(tǒng)疾病的治療。
　　2、對(duì)白花龍膽的商品及使用現(xiàn)狀進(jìn)行了深入的調(diào)查走訪，厘清了其商品的主流品種和使用情況。
　　根據(jù)調(diào)查走訪，結(jié)合文獻(xiàn)查考，本文認(rèn)為大花龍膽Gentiana szechenyii Kanitz最接近古本草描述，其次是高山龍膽G. algida Pall.“無莖”植株稱為“榜間嘎保瓊哇（小花）”均為標(biāo)準(zhǔn)收載的品種。前者在藥材市場(chǎng)上廣

4、泛流通，藏藥廠廣泛使用。后者與高山龍膽“有莖”植株、岷縣龍膽G. purdomii Marq.均被藏醫(yī)指認(rèn)為白花龍膽，主要為地方藏醫(yī)院、藏醫(yī)生自采用。短柄龍膽G. stipitata Edgew.在四川阿壩州、西藏昌都、青海部分地區(qū)做白花龍膽使用，且被一些藏藥圖典收載。
　　條紋龍膽、云南龍膽、瘦華麗龍膽植株形態(tài)與藏古本草描述出入較大，未見商品及藏醫(yī)院、鄉(xiāng)鎮(zhèn)藏醫(yī)使用，或?yàn)榈胤搅?xí)用品。云霧龍膽為《中華藏本草》等著作收載，其描述與《中

5、國(guó)植物志》描述有出入，或?yàn)檎`定。以上品種未見商品藥材流通。
　　另在白花龍膽商品藥材中發(fā)現(xiàn)有麻花秦艽、藍(lán)花龍膽等的混入，部分藏藥廠用藍(lán)花類龍膽代替白花龍膽使用。
　　3、對(duì)四川藏區(qū)白花龍膽的基原植物及龍膽屬藥用植物進(jìn)行了資源調(diào)查，為其資源保護(hù)、合理開發(fā)與利用提供參考依據(jù)。
　　配合第四次全國(guó)資源普查，本文對(duì)四川藏區(qū)白花龍膽的基原植物及龍膽屬藥用植物進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果表明，共有龍膽屬藥用植物28種，其中，涉及白花龍膽基原植

6、物5種（6個(gè)類型），即大花龍膽G。szechenyii Kanitz、高山龍膽G. algida pall.“無莖”植株、高山龍膽G. algida Pall.“有莖”植株、岷縣龍膽G. purdomii Marq.、短柄龍膽G. stipitata Edgew.、條紋龍膽G. striata Maxim.，尚有粗莖秦艽G. crassicaulis Duthie、麻花秦艽G. straminea Maxim.、藍(lán)玉簪龍膽G. veit

7、chiorum Hemsl.、華麗龍膽G. sino-ornata Balf等具有重要的藥用價(jià)值。其分布較廣，資源豐富，具有良好的開發(fā)與利用前景。
　　4、白花龍膽主流品種的品質(zhì)研究
　　4.1首次對(duì)不同基原的白花龍膽品種進(jìn)行了形態(tài)組織學(xué)系統(tǒng)研究，找出了其原植物、藥材性狀及顯微特征上的異同，為其品種鑒定提供了參考依據(jù)。
　　原植物形態(tài)上，主要從根的形狀大小，莖生葉的著生方式及形狀，花的大小形狀、花冠的顏色斑點(diǎn)的有無等方

8、面進(jìn)行鑒別。
　　藥材性狀上，主要從花冠、花萼的形狀、葉子的形狀及著生方式、花萼裂片及葉片邊緣等方面進(jìn)行鑒別。
　　顯微特征上，主要從花枝的莖中部橫切面內(nèi)皮層明顯與否、皮層與半徑之比，花冠內(nèi)表面，藥材粉末導(dǎo)管類型及草酸鈣晶體的類型等方面進(jìn)行鑒別。
　　不同基原的白花龍膽花粉粒和種皮的掃描電鏡觀察結(jié)果表明，花粉粒的表面紋飾和種皮的Ⅱ級(jí)紋飾可為種的鑒定提供參考。
　　4.2建立了白花龍膽中龍膽苦苷和獐牙菜苦苷的薄層色

9、譜鑒別方法及異葒草苷和異牡荊苷的薄層色譜鑒別方法，對(duì)不同基原白花龍膽進(jìn)行了薄層色譜鑒別，并與藍(lán)花龍膽（藍(lán)玉簪龍膽、華麗龍膽）、麻花秦艽（偽品）進(jìn)行了比較，找出了其異同，為分析其化學(xué)成分的差異提供了參考依據(jù)。
　　建立的薄層色譜鑒別方法分離效果較好，色譜斑點(diǎn)多而清晰，Rf值適中。通過對(duì)不同基原的白花龍膽、藍(lán)花龍膽、麻花秦艽進(jìn)行薄層色譜對(duì)比鑒別，結(jié)果表明，高山龍膽“無莖”植株、高山龍膽“有莖”植株、岷縣龍膽、藍(lán)玉簪龍膽、華麗龍膽、麻花

10、秦艽供試品色譜中，在與龍膽苦苷、獐牙菜苦苷對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同的熒光淬滅斑點(diǎn)，而大花龍膽、短柄龍膽則無此斑點(diǎn)；上述不同品種間的色譜斑點(diǎn)數(shù)目、大小及顏色深淺有區(qū)別。從異葒草苷和異牡荊苷薄層色譜鑒別結(jié)果看，除條紋龍膽、麻花秦艽外，其余品種的供試品色譜中，在與異葒草苷、異牡荊苷對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上均顯黃色熒光斑點(diǎn)，但不同品種間的色譜斑點(diǎn)的數(shù)目、大小和顏色深淺有區(qū)別。上述結(jié)果提示了不同品種間化學(xué)成分的差異。
　　4.3運(yùn)用傅里葉變換

11、紅外光譜法（FTIR）對(duì)不同基原的白花龍膽、藍(lán)花龍膽及混偽品進(jìn)行了鑒別研究，建立了其紅外特征光譜，找出不同品種之間的區(qū)別，認(rèn)為二階導(dǎo)數(shù)紅外光譜能區(qū)別近似種。
　　4.4首次建立了白花龍膽的HPLC指紋圖譜鑒別方法，應(yīng)用主成分、聚類分析等方法對(duì)白花龍膽、藍(lán)花龍膽、及混偽品共62批樣品進(jìn)行了對(duì)比分析。結(jié)果表明，不同品種、同一品種不同植株部位及不同存放時(shí)間樣品的指紋圖譜在色譜峰的數(shù)目、峰面積上差異較大。大花龍膽與短柄龍膽相似度較高；高山

12、龍膽“無莖”植株、高山龍膽“有莖”植株無明顯差異，與岷縣龍膽相似度高。通過統(tǒng)計(jì)分析，大花龍膽、短柄龍膽聚為一類，高山龍膽“無莖”植株、高山龍膽“有莖”植株與岷縣龍膽聚為一類。藍(lán)花類龍膽聚為一類，與高山龍膽、岷縣龍膽距離較近，與大花龍膽、短柄龍膽距離較遠(yuǎn)。且大花龍膽、短柄龍膽的地上部分與地下部分的距離較遠(yuǎn)，揭示同一品種不同部位化學(xué)成分差異較大。另，同一品種不同存放時(shí)間的樣品距離也較遠(yuǎn)。
　　4.5按《中國(guó)藥典》第一部（附錄Ⅸ H第一

13、法）及（附錄ⅨK）方法，進(jìn)行了不同基原白花龍膽共43批樣品的水分、總灰分及酸不溶性灰分的測(cè)定，結(jié)果表明，水分最高10％，最低為6%，平均為7.82%；總灰分最高為7.1%，最低為3.5%，平均為5.4%；酸不溶性灰分最高為3.8%，最低為0.6%，平均為1.71%。為其限量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了參考依據(jù)。
　　4.6建立了白花龍膽浸出物測(cè)定方法，以70%乙醇為溶劑，熱浸法測(cè)定。根據(jù)43批不同基原白花龍膽樣品的測(cè)定結(jié)果，最高為38.25%

14、，最低為21.98%，平均29.73%；整體看以短柄龍膽的浸出物含量稍高。
　　4.7首次建立了HPLC同時(shí)測(cè)定白花龍膽中龍膽苦苷、獐牙菜苦苷、異葒草苷、異牡荊苷4種化學(xué)成分含量的方法，并對(duì)43批不同基原、不同存放時(shí)間的白花龍膽樣品進(jìn)行了含量測(cè)定，結(jié)果表明，大花龍膽、短柄龍膽的異牡荊苷含量均明顯高于異葒草苷，而龍膽苦苷、獐牙菜苦苷未檢出。高山龍膽、岷縣龍膽的龍膽苦苷、異葒草苷含量明顯高于獐牙菜苦苷、異牡荊苷。條紋龍膽的4種化學(xué)成分

15、含量均較低。存放時(shí)間久的樣品4種化學(xué)成分普遍較低。
　　5、結(jié)合藏藥“榜間嘎保”的藏醫(yī)功效及臨床用法，首次對(duì)大花龍膽、高山龍膽、短柄龍膽、藍(lán)玉簪龍膽（藍(lán)花龍膽）及十五味榜間丸（藏成藥）進(jìn)行了藥效學(xué)對(duì)比研究，為其臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。
　　體內(nèi)抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以雌性小鼠抗菌實(shí)驗(yàn)看，十五味榜間丸、短柄龍膽、藍(lán)玉簪龍膽顯示了較好的抗菌作用。結(jié)合雄性小鼠抗菌實(shí)驗(yàn)看，大花龍膽亦顯示了較好的抗菌效果?？傮w上，十五味榜間丸效果最好，其

16、次是短柄龍膽、大花龍膽、藍(lán)玉簪龍膽。
　　對(duì)小鼠慢性支氣管炎的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，十五味榜間丸、高山龍膽、藍(lán)玉簪龍膽的高低劑量組均能夠提高小鼠肺組織中SOD的活力和明顯降低小鼠肺組織中TNF-α和IL-10的水平，對(duì)小鼠慢性支氣管炎模型顯示出較好的治療效果，而大花龍膽、短柄龍膽的作用不明顯。
　　6通過本文研究，為藏藥“榜間嘎?！钡钠贩N來源及規(guī)范化質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供了參考依據(jù)，為其資源的可持續(xù)利用與開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。