藏藥“榜間嘎保”品種整理及主流品種的品質(zhì)研究.pdf

1、藏藥“榜間嘎?！?，即白花龍膽，為大宗常用藏藥材，臨床上用于治毒病，各種熱癥，喉炎熱閉。為十五味龍膽花丸、二十五味龍膽花丸等經(jīng)典藏成藥的君材，療效確切。本研究針對其來源復(fù)雜，分類混亂，現(xiàn)代藏醫(yī)藥學(xué)著作及國家、地方標(biāo)準(zhǔn)收載的品種不一致，質(zhì)量控制方法簡單，缺乏內(nèi)在質(zhì)量評價的標(biāo)準(zhǔn)，臨床使用缺乏科學(xué)依據(jù)等問題，采用文獻(xiàn)分析、實地調(diào)查、生藥研究、化學(xué)成分分析、藥效評價相結(jié)合的方法，對藏藥“榜間嘎?！边M(jìn)行了系統(tǒng)的品種整理及主流品種的質(zhì)量研究，得到如下

2、結(jié)果。
　　1、對白花龍膽進(jìn)行了系統(tǒng)的文獻(xiàn)整理，為其臨床使用及合理的開發(fā)利用提供一手資料。
　　本文首次發(fā)現(xiàn)藏藥“榜間嘎?！弊钤缬涊d于《月王藥診》，更正了藏醫(yī)藥專著《中華本草·藏藥卷》等文獻(xiàn)中有關(guān)其始載于《四部醫(yī)典》的錯誤提法。梳理了藏本草及相關(guān)文獻(xiàn)記載做“榜間嘎?！笔褂玫钠贩N，對其中的品種歸并、命名異議的問題做了分析。最終整理文獻(xiàn)記載的白花龍膽基原植物達(dá)7種，1變種。弄清了印度佛經(jīng)典籍及藏醫(yī)學(xué)對“榜間嘎?！钡墓πе髦渭坝梅?/p>

3、，并總結(jié)了70余首含白花龍膽的經(jīng)典藏成藥方，有2/3的藏成方臨床上主要用于呼吸系統(tǒng)疾病的治療。
　　2、對白花龍膽的商品及使用現(xiàn)狀進(jìn)行了深入的調(diào)查走訪，厘清了其商品的主流品種和使用情況。
　　根據(jù)調(diào)查走訪，結(jié)合文獻(xiàn)查考，本文認(rèn)為大花龍膽Gentiana szechenyii Kanitz最接近古本草描述，其次是高山龍膽G. algida Pall.“無莖”植株稱為“榜間嘎保瓊哇（小花）”均為標(biāo)準(zhǔn)收載的品種。前者在藥材市場上廣

4、泛流通，藏藥廠廣泛使用。后者與高山龍膽“有莖”植株、岷縣龍膽G. purdomii Marq.均被藏醫(yī)指認(rèn)為白花龍膽，主要為地方藏醫(yī)院、藏醫(yī)生自采用。短柄龍膽G. stipitata Edgew.在四川阿壩州、西藏昌都、青海部分地區(qū)做白花龍膽使用，且被一些藏藥圖典收載。
　　條紋龍膽、云南龍膽、瘦華麗龍膽植株形態(tài)與藏古本草描述出入較大，未見商品及藏醫(yī)院、鄉(xiāng)鎮(zhèn)藏醫(yī)使用，或為地方習(xí)用品。云霧龍膽為《中華藏本草》等著作收載，其描述與《中

5、國植物志》描述有出入，或為誤定。以上品種未見商品藥材流通。
　　另在白花龍膽商品藥材中發(fā)現(xiàn)有麻花秦艽、藍(lán)花龍膽等的混入，部分藏藥廠用藍(lán)花類龍膽代替白花龍膽使用。
　　3、對四川藏區(qū)白花龍膽的基原植物及龍膽屬藥用植物進(jìn)行了資源調(diào)查，為其資源保護、合理開發(fā)與利用提供參考依據(jù)。
　　配合第四次全國資源普查，本文對四川藏區(qū)白花龍膽的基原植物及龍膽屬藥用植物進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果表明，共有龍膽屬藥用植物28種，其中，涉及白花龍膽基原植

6、物5種（6個類型），即大花龍膽G。szechenyii Kanitz、高山龍膽G. algida pall.“無莖”植株、高山龍膽G. algida Pall.“有莖”植株、岷縣龍膽G. purdomii Marq.、短柄龍膽G. stipitata Edgew.、條紋龍膽G. striata Maxim.，尚有粗莖秦艽G. crassicaulis Duthie、麻花秦艽G. straminea Maxim.、藍(lán)玉簪龍膽G. veit

7、chiorum Hemsl.、華麗龍膽G. sino-ornata Balf等具有重要的藥用價值。其分布較廣，資源豐富，具有良好的開發(fā)與利用前景。
　　4、白花龍膽主流品種的品質(zhì)研究
　　4.1首次對不同基原的白花龍膽品種進(jìn)行了形態(tài)組織學(xué)系統(tǒng)研究，找出了其原植物、藥材性狀及顯微特征上的異同，為其品種鑒定提供了參考依據(jù)。
　　原植物形態(tài)上，主要從根的形狀大小，莖生葉的著生方式及形狀，花的大小形狀、花冠的顏色斑點的有無等方

8、面進(jìn)行鑒別。
　　藥材性狀上，主要從花冠、花萼的形狀、葉子的形狀及著生方式、花萼裂片及葉片邊緣等方面進(jìn)行鑒別。
　　顯微特征上，主要從花枝的莖中部橫切面內(nèi)皮層明顯與否、皮層與半徑之比，花冠內(nèi)表面，藥材粉末導(dǎo)管類型及草酸鈣晶體的類型等方面進(jìn)行鑒別。
　　不同基原的白花龍膽花粉粒和種皮的掃描電鏡觀察結(jié)果表明，花粉粒的表面紋飾和種皮的Ⅱ級紋飾可為種的鑒定提供參考。
　　4.2建立了白花龍膽中龍膽苦苷和獐牙菜苦苷的薄層色

9、譜鑒別方法及異葒草苷和異牡荊苷的薄層色譜鑒別方法，對不同基原白花龍膽進(jìn)行了薄層色譜鑒別，并與藍(lán)花龍膽（藍(lán)玉簪龍膽、華麗龍膽）、麻花秦艽（偽品）進(jìn)行了比較，找出了其異同，為分析其化學(xué)成分的差異提供了參考依據(jù)。
　　建立的薄層色譜鑒別方法分離效果較好，色譜斑點多而清晰，Rf值適中。通過對不同基原的白花龍膽、藍(lán)花龍膽、麻花秦艽進(jìn)行薄層色譜對比鑒別，結(jié)果表明，高山龍膽“無莖”植株、高山龍膽“有莖”植株、岷縣龍膽、藍(lán)玉簪龍膽、華麗龍膽、麻花

10、秦艽供試品色譜中，在與龍膽苦苷、獐牙菜苦苷對照品色譜相應(yīng)位置上顯相同的熒光淬滅斑點，而大花龍膽、短柄龍膽則無此斑點；上述不同品種間的色譜斑點數(shù)目、大小及顏色深淺有區(qū)別。從異葒草苷和異牡荊苷薄層色譜鑒別結(jié)果看，除條紋龍膽、麻花秦艽外，其余品種的供試品色譜中，在與異葒草苷、異牡荊苷對照品色譜相應(yīng)位置上均顯黃色熒光斑點，但不同品種間的色譜斑點的數(shù)目、大小和顏色深淺有區(qū)別。上述結(jié)果提示了不同品種間化學(xué)成分的差異。
　　4.3運用傅里葉變換

11、紅外光譜法（FTIR）對不同基原的白花龍膽、藍(lán)花龍膽及混偽品進(jìn)行了鑒別研究，建立了其紅外特征光譜，找出不同品種之間的區(qū)別，認(rèn)為二階導(dǎo)數(shù)紅外光譜能區(qū)別近似種。
　　4.4首次建立了白花龍膽的HPLC指紋圖譜鑒別方法，應(yīng)用主成分、聚類分析等方法對白花龍膽、藍(lán)花龍膽、及混偽品共62批樣品進(jìn)行了對比分析。結(jié)果表明，不同品種、同一品種不同植株部位及不同存放時間樣品的指紋圖譜在色譜峰的數(shù)目、峰面積上差異較大。大花龍膽與短柄龍膽相似度較高；高山

12、龍膽“無莖”植株、高山龍膽“有莖”植株無明顯差異，與岷縣龍膽相似度高。通過統(tǒng)計分析，大花龍膽、短柄龍膽聚為一類，高山龍膽“無莖”植株、高山龍膽“有莖”植株與岷縣龍膽聚為一類。藍(lán)花類龍膽聚為一類，與高山龍膽、岷縣龍膽距離較近，與大花龍膽、短柄龍膽距離較遠(yuǎn)。且大花龍膽、短柄龍膽的地上部分與地下部分的距離較遠(yuǎn)，揭示同一品種不同部位化學(xué)成分差異較大。另，同一品種不同存放時間的樣品距離也較遠(yuǎn)。
　　4.5按《中國藥典》第一部（附錄Ⅸ H第一

13、法）及（附錄ⅨK）方法，進(jìn)行了不同基原白花龍膽共43批樣品的水分、總灰分及酸不溶性灰分的測定，結(jié)果表明，水分最高10％，最低為6%，平均為7.82%；總灰分最高為7.1%，最低為3.5%，平均為5.4%；酸不溶性灰分最高為3.8%，最低為0.6%，平均為1.71%。為其限量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了參考依據(jù)。
　　4.6建立了白花龍膽浸出物測定方法，以70%乙醇為溶劑，熱浸法測定。根據(jù)43批不同基原白花龍膽樣品的測定結(jié)果，最高為38.25%

14、，最低為21.98%，平均29.73%；整體看以短柄龍膽的浸出物含量稍高。
　　4.7首次建立了HPLC同時測定白花龍膽中龍膽苦苷、獐牙菜苦苷、異葒草苷、異牡荊苷4種化學(xué)成分含量的方法，并對43批不同基原、不同存放時間的白花龍膽樣品進(jìn)行了含量測定，結(jié)果表明，大花龍膽、短柄龍膽的異牡荊苷含量均明顯高于異葒草苷，而龍膽苦苷、獐牙菜苦苷未檢出。高山龍膽、岷縣龍膽的龍膽苦苷、異葒草苷含量明顯高于獐牙菜苦苷、異牡荊苷。條紋龍膽的4種化學(xué)成分

15、含量均較低。存放時間久的樣品4種化學(xué)成分普遍較低。
　　5、結(jié)合藏藥“榜間嘎?！钡牟蒯t(yī)功效及臨床用法，首次對大花龍膽、高山龍膽、短柄龍膽、藍(lán)玉簪龍膽（藍(lán)花龍膽）及十五味榜間丸（藏成藥）進(jìn)行了藥效學(xué)對比研究，為其臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。
　　體內(nèi)抗菌實驗結(jié)果表明，以雌性小鼠抗菌實驗看，十五味榜間丸、短柄龍膽、藍(lán)玉簪龍膽顯示了較好的抗菌作用。結(jié)合雄性小鼠抗菌實驗看，大花龍膽亦顯示了較好的抗菌效果?？傮w上，十五味榜間丸效果最好，其

16、次是短柄龍膽、大花龍膽、藍(lán)玉簪龍膽。
　　對小鼠慢性支氣管炎的影響實驗結(jié)果表明，十五味榜間丸、高山龍膽、藍(lán)玉簪龍膽的高低劑量組均能夠提高小鼠肺組織中SOD的活力和明顯降低小鼠肺組織中TNF-α和IL-10的水平，對小鼠慢性支氣管炎模型顯示出較好的治療效果，而大花龍膽、短柄龍膽的作用不明顯。
　　6通過本文研究，為藏藥“榜間嘎?！钡钠贩N來源及規(guī)范化質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供了參考依據(jù)，為其資源的可持續(xù)利用與開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。