用“半仿生—生物酶法”對二陳湯的試驗(yàn)研究.pdf

1、目的:以二陳湯為例,初步探討中藥復(fù)方藥效物質(zhì)用“半仿生-生物酶法”研究的基本模式。方法:以橙皮苷、甘草次酸、分子量≤1000干膏量、HPLC總峰面積、總多糖含量、干浸膏等為指標(biāo),在預(yù)處理?xiàng)l件相同的前提下,首先通過正交設(shè)計(jì)優(yōu)選半仿生-生物酶法提取二陳湯的最佳工藝,考察的因素有加酶量和種類、pH值、提取時(shí)間、溫度;然后通過以上確定的最佳提取工藝和指標(biāo),將方中6味中藥,按照君臣佐使分為四組,組合成15種方式進(jìn)行提取,優(yōu)選最佳的組合提取方式;然

2、后根據(jù)確定的最佳提取組合方式用均勻設(shè)計(jì)的方法優(yōu)選二陳湯的最佳半仿生提取工藝并用比例分割法優(yōu)選二陳湯醇提取法的最佳提取醇濃度;最后以橙皮苷、甘草次酸、分子量≤1000干膏量、HPLC總峰面積、總多糖含量、干浸膏等為指標(biāo),比較半仿生-生物酶法、半仿生提取法、醇提取法和水提取法的優(yōu)劣。結(jié)果:二陳湯方藥用“半仿生-生物酶法”的提取條件為:將方藥粉碎成粗粉,生姜和烏梅不作處理,先用2％酶Ⅰ(以藥材重量計(jì))預(yù)處理12h;陳皮、茯苓、甘草和烏梅混合提

3、取,半夏、生姜單獨(dú)提取,分別提取3次,第一次加入10倍量(以藥材重量計(jì))的pH2.0的水,0.5%酶Ⅲ,浸提60min;第二次加入8倍量的水(pH6.5),浸提30min;第三次加入8倍量的水(pH9.0),1%酶Ⅳ,浸提30min;提取溫度為:371℃;SBE法的工藝條件為:三煎加水量分別為10、8、8倍,三煎用水的pH值依次為2.00、6.5、8.0;3煎時(shí)間分別為1、0.5、0.5h;醇提法最佳乙醇提純濃度為30%。方藥4種提取方