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1、本文通過(guò)活體誘導(dǎo)和離體誘導(dǎo)兩種方式進(jìn)行同源四倍體青花菜的誘導(dǎo),并對(duì)獲得的二、四倍體的倍性進(jìn)行了鑒定,同時(shí)以‘滬綠’二、四倍體為材料進(jìn)行了主要農(nóng)藝性狀、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的研究分析,為同源四倍體青花菜的遺傳育種提供理論基礎(chǔ),同時(shí)豐富青花菜種質(zhì)資源庫(kù)。
1.采用0.1%,0.15%,0.2%和0.3%四個(gè)濃度的秋水仙素對(duì)青花菜子葉期生長(zhǎng)點(diǎn)進(jìn)行不同次數(shù)滴定處理誘導(dǎo)多倍體,并利用形態(tài)學(xué)鑒定、氣孔鑒定、流式細(xì)胞儀及花蕾染色體計(jì)數(shù)等方法進(jìn)行倍性鑒定
2、。結(jié)果表明:(1)以0.1%秋水仙素處理4次,誘導(dǎo)效果最佳,植株存活率為100%,四倍體誘導(dǎo)率為5.63%;(2)與二倍體相比,四倍體葉片表現(xiàn)出大、圓的特征,通過(guò)對(duì)花器官等的觀察比較,花器官等表現(xiàn)出不同程度的增加,花蕾大小、花瓣大小、雌蕊長(zhǎng)、萼片大小的增幅分別為48.56%×17.00%、27.59%×25.30%、14.94%和37.69%×10.19%,差異顯著;在結(jié)籽期,四倍體的種莢大小、角果喙長(zhǎng)和種子直徑分別比二倍體增加了31.
3、63%×21.79%、24.57%和33.53%,種莢長(zhǎng)與種子直徑表現(xiàn)差異顯著;(3)四倍體氣孔大小和密度與二倍體相比較,差異達(dá)到顯著水平;(4)流式細(xì)胞儀鑒定四倍體的DNA含量約為二倍體的2倍;二倍體青花菜染色體數(shù)為2n=2x=18,四倍體為2n=4x=36。
2.在農(nóng)藝性狀及營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)方面對(duì)同源四倍體及二倍體進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:(1)與二倍體相比,四倍體在株高、開展度、葉片、側(cè)枝數(shù)、葉數(shù)等方面表現(xiàn)出不同程度的增加,四倍體的
4、株高和最大葉柄長(zhǎng)較二倍體差異極顯著,四倍體莖粗和葉數(shù)較二倍體差異顯著;(2)四倍體花球表現(xiàn)出巨大性,花球直徑較二倍體增加了9.16%,差異顯著,單球重增加了20.88%;(3)四倍體中可溶性蛋白、可溶性糖、硝酸鹽及葉綠素較二倍體增加,干物質(zhì)含量下降;(4)花蕾、花莖和葉片中總硫代葡萄糖苷和蘿卜硫素的含量花莖>花蕾>葉片;四倍體花蕾、花莖和葉片中的總硫代葡萄糖苷含量比二倍體中分別增加20.12%、14.20%和56.65%,蘿卜硫素含量比
5、二倍體分別增加48.91%、82.32%和27.50%。
3.研究秋水仙素離體雙層培養(yǎng)誘導(dǎo)對(duì)3種青花菜染色體加倍的誘導(dǎo)效應(yīng),建立青花菜四倍體的離體雙層培養(yǎng)誘導(dǎo)體系,為植物倍性育種提供新途徑。結(jié)果表明:(1)以子葉期保留下胚軸0.4-0.6 cm的子葉為外植體,接入含不同濃度的秋水仙素離體雙層培養(yǎng)基(上層為含秋水仙素的液體培養(yǎng)基,下層為不舍秋水仙素的固體培養(yǎng)基)中誘導(dǎo)24 h,48 h和96 h,以300 mg·L-1秋水仙素處
6、理48 h誘導(dǎo)獲得四倍體的效果最佳,LQ-2,S139-2和LQ-23三個(gè)材料外植體存活率達(dá)100%,增殖系數(shù)分別為2、2.33和2.67,四倍體誘導(dǎo)率分別為66.67%、71.42%和62.50%;(2)與二倍體相比,四倍體植株在株高、葉片、花球等性狀上增大,氣孔大小和密度具有顯著差異,LQ-2,S139-2和LQ-23三個(gè)材料的花粉粒增大,增幅分別為18.85%×63.71%、25.00%×34.68%和3.36%×61.86%;(
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