蘿卜游離小孢子培養(yǎng)與同源四倍體創(chuàng)制研究.pdf

1、蘿卜(Raphanus sativus L.)為十字花科蘿卜屬中能形成肉質(zhì)根的一、二年生草本植物，是我國(guó)重要的蔬菜作物之一，具有較高的食用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。蘿卜小孢子培養(yǎng)和同源四倍體的誘導(dǎo)是蘿卜種質(zhì)創(chuàng)新的兩種重要途徑，但是目前蘿卜小孢子培養(yǎng)受基因型限制嚴(yán)重，高效的胚狀體誘導(dǎo)和植株再生體系尚未建立，而且蘿卜同源四倍體的誘導(dǎo)和鑒定體系也不完善。
　　 本研究在蘿卜小孢子培養(yǎng)研究中，選用不同蘿卜品種為試材，研究影響小孢子培養(yǎng)和植株再生的

2、因素；在四倍體誘導(dǎo)研究中，嘗試采用DMSO輔助秋水仙素誘導(dǎo)蘿卜同源四倍體，并比較二倍體和四倍體蘿卜的特征特性差異，以期進(jìn)一步完善蘿卜小孢子培養(yǎng)體系，提高同源四倍體蘿卜誘導(dǎo)率，為蘿卜品種的改良提供新種質(zhì)，并為小孢子培養(yǎng)和同源四倍體誘導(dǎo)提供技術(shù)支撐。蘿卜游離小孢子培養(yǎng)研究方面，共得到了14個(gè)具有成胚能力的基因型，不同基因型之間成胚率有顯著差異；通過(guò)小孢子不同發(fā)育時(shí)期的熒光觀察發(fā)現(xiàn)花蕾長(zhǎng)度處于2.5～3.5 mm時(shí)小孢子處于單核靠邊期的比例最

3、高；培養(yǎng)基中添加1～2 mg/L的硝酸銀或0.05 mg/L的6-BA能提高某些基因型小孢子的胚狀體產(chǎn)量；培養(yǎng)基中添加0.1 g/L活性炭可有效提高胚狀體質(zhì)量，減少畸形胚比例；子葉胚在添加0.2mg/L的6-BA和0.02mg/L的NAA的MS-3培養(yǎng)基中可直接成苗，對(duì)于不能直接成苗的子葉胚可以在培養(yǎng)基MS-3+4 mg/L AgNO3+0.2 mg/L TDZ+0.5 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA上通過(guò)誘導(dǎo)愈傷組織分化形

4、成次生胚，進(jìn)而發(fā)育成苗；最適宜的生根培養(yǎng)基類型為B5+0.1 mg/LNAA。在誘導(dǎo)同源四倍體蘿卜的試驗(yàn)中，Nau-dqt，Nau-qtbjq與Nau-dy13得到了四倍體植株，品種Nau-qtbjiq獲得四倍體誘導(dǎo)率最高，同時(shí)0.1％秋水仙素和0.2％的二甲基亞砜處理3個(gè)品種得到的四倍體誘導(dǎo)率都是最高；四倍體蘿卜與二倍體蘿卜相比，幼苗期生長(zhǎng)緩慢，真葉期葉片皺縮，花期晚；3個(gè)品種的四倍體植株花瓣橫徑增長(zhǎng)，花粉粒變大，保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)葉綠體數(shù)目