同種異體脂肪干細胞組織工程骨修復管狀骨缺損.pdf

1、目的：脂肪干細胞（Adipose-Derived Stem Cell, ADSCs）因具有良好的成骨分化潛能而常被用來做為骨組織工程的種子細胞。本實驗在脂肪干細胞提取、培養(yǎng)及成骨誘導分化所做工作的基礎上，建立兔尺骨缺損模型，進一步探討同種異體脂肪干細胞組織工程骨修復管狀骨缺損的可行性。
　　方法：（1）獲取新西蘭大白兔的肩胛部脂肪，分離培養(yǎng)具有多向分化潛能的脂肪干細胞；（2）以成骨誘導液培養(yǎng)的第3代細胞（P3）為實驗組，LG-DM

2、EM作為對照組。DNA定量法測定細胞的增殖曲線、定性檢測堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase, ALP）及細胞外鈣鹽沉積情況；（3）P3兔ADSCs與脫鈣骨材料復合后，體外成骨誘導培養(yǎng)（LG-DMEM設為對照）。用掃描電鏡對細胞-材料復合物的表面進行觀察、DIO標記細胞后采用激光共聚焦顯微鏡觀察細胞生長情況、定量檢測堿性磷酸酶及細胞外鈣離子；（4）制造兔兩側(cè)尺骨臨界大?。?5mm長度）的缺損，分別植入兔ADSCs-脫鈣骨

3、復合物體（實驗組）和單純脫鈣骨材料（對照組）；（5）12周后取樣本，行三維CT和組織學檢測，觀察成骨情況。
　　結(jié)果：兔ADSCs體外增殖能力強，且具有多向分化潛能；與脫鈣骨材料具有良好的細胞相容性；細胞材料復合物植入12周后，三維CT顯示實驗組有新生骨基質(zhì)長成，對照組未見骨組織生成。組織學檢測顯示實驗組缺損處被典型的骨組織取代，可見新生骨小梁附著于脫鈣骨表面，而對照組中只有少量的骨組織和纖維組織充填。
　　結(jié)論：通過正確的