LyP-1-SiO-,2-納米復(fù)合物對(duì)肝癌靶向性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究LyP-1/SiO2納米復(fù)合物對(duì)肝癌的靶向性及其應(yīng)用前景。 方法:通過(guò)靜電自組裝，在SiO2納米顆粒表面依次修飾帶正電的聚二甲基二烯丙基氯化胺(Poly(diallyldimethylammoniumchloride)，PDADMAC)和帶負(fù)電的聚丙烯酸(Poly(acrylic acid)，PAA)，獲得羧基化的SiO2納米粒子。進(jìn)而將PAA上的羧基在1-乙基-3(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(1-ethyl-

2、3(3-dimethylamino propyl)-carbodiimide，EDC)活化下與LyP-1(CGNKRTRGC)上的氨基發(fā)生反應(yīng)，從而使LyP-1成功地連接到SiO2納米顆粒表面形成Lyp-1/SiO2納米復(fù)合物。用熒光標(biāo)記的LyP-1與HepG2細(xì)胞培養(yǎng)，熒光顯微鏡下觀察熒光與細(xì)胞結(jié)合情況，并以MDA-MB-231細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照，L-02細(xì)胞及FITC作陰性對(duì)照。將熒光標(biāo)記過(guò)的LyP-1/SiO2納米復(fù)合物與HepG2

3、細(xì)胞培養(yǎng)，熒光顯微鏡下觀察熒光與細(xì)胞結(jié)合情況。將熒光標(biāo)記過(guò)的LyP-1/SiO2納米復(fù)合物通過(guò)尾靜脈注射入皮下種植HepG2移植瘤的裸鼠，循環(huán)一定時(shí)間后在熒光顯微鏡下觀察腫瘤、肝臟、脾臟和腎臟的冰凍切片。 結(jié)果:與LyP-1共培養(yǎng)后觀察到MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)明顯有熒光，HepG2細(xì)胞也可見(jiàn)熒光，但HepG2組較MDA-MB-231組熒光強(qiáng)度稍弱。FITC與L-02與HepG2共培養(yǎng)組無(wú)明顯熒光。LyP-1/SiO2納米復(fù)合

4、物與HepG2共培養(yǎng)后可在細(xì)胞中觀察到熒光，熒光強(qiáng)度與LyP-1的HepG2組類(lèi)似。注射熒光標(biāo)記LyP-1/SiO2納米復(fù)合物的裸鼠移植瘤切片可見(jiàn)熒光。裸鼠肝臟、腎臟未見(jiàn)明顯熒光，脾臟可見(jiàn)少量熒光。 結(jié)論:LyP-1對(duì)SiO2納米顆粒的修飾提供了一種簡(jiǎn)便高效制備靶向性納米載體的方法，為將來(lái)的納米載體制備的大規(guī)模開(kāi)發(fā)提供前提。而LyP-1/SiO2納米復(fù)合物能與HepG2細(xì)胞及HepG2裸鼠移植瘤組織特異性地結(jié)合，這將為肝癌靶向治