石蠟包埋組織個(gè)體識(shí)別研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文石蠟包埋組織個(gè)體識(shí)別研究Individualidentificationofparaffinembeddedtissue課題來(lái)源：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目學(xué)位申請(qǐng)人呂晉導(dǎo)師姓名劉超教授專業(yè)名稱法醫(yī)學(xué)培養(yǎng)類型學(xué)術(shù)型培養(yǎng)層次碩士研究生所在學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2013年5月9日廣州摘要固定液的PH值，溫度以及固定時(shí)間的長(zhǎng)短等；3固定后因素，例如固定后儲(chǔ)存時(shí)間的長(zhǎng)短和儲(chǔ)存溫度的高低等。面對(duì)如此多的影響因素，想要找到一種理想

2、的提取方法還需進(jìn)一步研究，并結(jié)合考慮樣材的情況。福爾馬林固定石蠟包埋組織被要求做個(gè)體識(shí)別和親子鑒定的需求有增多趨勢(shì)。而且這些組織大部分都是腫瘤組織，惡性腫瘤十分常見(jiàn)，惡性腫瘤組織中普遍存在著基因編碼區(qū)或非編碼區(qū)的變異，這種變異同樣可以發(fā)生在法醫(yī)學(xué)檢測(cè)常用的15個(gè)STR基因座中。因此，研究常見(jiàn)腫瘤組織STR變異性十分必要。短串聯(lián)重復(fù)序歹IJ(STR)廣泛存在于真核生物的基因組中，具有高度的多態(tài)性。因?yàn)槠浜诵男蛄休^小通常為26bp，重復(fù)次數(shù)

3、通常為1530次，所以其片段長(zhǎng)度較小，PCR擴(kuò)增結(jié)果穩(wěn)定，加上STR基因座的高度多態(tài)性在基因傳遞過(guò)程中遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律，它的這些特點(diǎn)使得PCRSTR復(fù)合擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)成為法醫(yī)學(xué)不可缺少的一項(xiàng)重要的技術(shù)手段。雖然，PCRSTR符合擴(kuò)增技術(shù)在組織身源認(rèn)定的案件中應(yīng)用廣泛，但是這樣的檢測(cè)技術(shù)是有其假設(shè)前提的，既同一個(gè)體的任何組織的STR基因型都是完全一致的。當(dāng)遇到的檢材是腫瘤組織的時(shí)候，這樣的假設(shè)前提便不再存在。已有研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤組織的基因

4、組中，不論是編碼區(qū)還是非編碼區(qū)都有可能發(fā)生變異，這種現(xiàn)象在STR基因座內(nèi)同樣可以觀察到。在腫瘤組織內(nèi)的這種變異表現(xiàn)為雜合性丟失(10ssofheterozygosity，LOH)和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(microsatelliteinstability，MSI)，這些改變都可能會(huì)對(duì)PCRSTR復(fù)合擴(kuò)增檢測(cè)造成影響，導(dǎo)致腫瘤組織與正常組織STR分型結(jié)果不一致。方法1脫蠟方法11水浴加熱脫蠟將組織樣本放入15mlEP管中，向管內(nèi)加入1000ulT