青藏高原高寒草甸鈍裂銀蓮花居群遺傳多樣性及其與生態(tài)因子的相關(guān)研究.pdf

1、鈍裂銀蓮花（Anemone obtusiloba）是一種青藏高原東緣高寒草甸中比較常見的毒雜草，花色從白色過渡到黃色，為牲畜不食。本文采用RAPD基因組DNA分子標(biāo)記技術(shù)對甘南州不同花色的11個居群進(jìn)行遺傳多樣分析，并將遺傳多樣性與樣地的生態(tài)因子進(jìn)行相關(guān)性分析。實驗結(jié)果表明：
　　1.合作、碌曲、瑪曲和阿孜4個樣地的土壤水分含量有顯著性差異（P＜0.05），大小順序如下：瑪曲＞碌曲＞阿孜＞合作；4個樣地的土壤皆呈現(xiàn)中性偏酸性，但碌

2、曲樣地土壤的pH顯著低于其他三個樣地（P＜0.05）；土壤速效磷含量極高，之間沒有顯著性差異；全磷含量極高，瑪曲和阿孜樣地土壤全磷含量顯著高于合作和碌曲的（P＜0.05）；有效氮含量極高，但樣地之間存在顯著性差異（P＜0.05），大小順序為：阿孜＞瑪曲，碌曲＞合作；4個樣地的速效鉀含量水平均較高，阿孜、瑪曲和碌曲的樣地土壤速效鉀含量之間有顯著性差異(P＜0.05），合作的和碌曲的之間也有顯著性差異（P＜0.05），合作的與阿孜、瑪曲的之

3、間沒有顯著性差異，大小順序如下：阿孜＞瑪曲＞碌曲，合作＞碌曲。
　　2.采用正交試驗和單因素試驗相結(jié)合的方法確定了RAPD-PCR最優(yōu)反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序：總體系20μL，DNA模板30ng，primer0.4mmol/L，Taq DNA聚合酶0.5U，dNTPs0.4mmol/L，10×Buffer2μL，Mg2+2.5mmol/L,ddH2O14μL；預(yù)變性96℃5min30sec，變性94℃1min10sec，退火37℃1mi

4、n40sec延伸72℃1min10sec，續(xù)補(bǔ)72℃6min30sec，循環(huán)數(shù)40。
　　3.瑪曲黃色（MQY）居群的多態(tài)位點(diǎn)百分率最高，相對地，瑪曲白色（MQW）居群的最低，各地域白色居群多態(tài)位點(diǎn)均低于黃色和淺色居群的?？傮w多態(tài)位點(diǎn)百分率高于各亞居群（MQY除外）。各亞居群Shannon信息指數(shù)和 Nei’s指數(shù)估計的基因多樣性大小順序和多態(tài)位點(diǎn)百分率的順序基本一致。鈍裂銀蓮花的遺傳變異主要發(fā)生在種群內(nèi)，但亞居群間已發(fā)生一定的遺