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1、在傳統(tǒng)的海水育苗生產(chǎn)中,由于高密度養(yǎng)殖,水體中氨氮等有毒物質(zhì)含量的不斷增加,極易引起養(yǎng)殖環(huán)境的水質(zhì)惡化。同時(shí)懸浮餌料微藻的供應(yīng)方式也容易造成餌料的流失,從而嚴(yán)重影響動(dòng)物苗種的生長(zhǎng)發(fā)育。固定化細(xì)胞技術(shù)是構(gòu)建生物反應(yīng)器的一項(xiàng)重要生物工程技術(shù),對(duì)餌料微藻進(jìn)行固定化培養(yǎng),可以達(dá)到兩個(gè)目的:一個(gè)是改善水質(zhì),另一個(gè)是為魚蝦蟹幼苗提供活餌料。因此,研究適于海水育苗水體的餌料微藻固定化的培養(yǎng)條件,探索固定化微藻作為育苗環(huán)境水質(zhì)改良調(diào)節(jié)劑的新方法,對(duì)于固
2、定化細(xì)胞技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域的發(fā)展應(yīng)用,具有一定的理論與實(shí)際意義。本研究對(duì)幾株海洋微藻進(jìn)行固定化培養(yǎng),開展以下幾方面的研究: 1、對(duì)8株水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的餌料微藻以及3株自然海域分離的野生海洋微藻進(jìn)行固定化培養(yǎng)摸索,并選擇有代表性的叉鞭金藻(Diorateria sp.)和云微藻(Chlorellasp.)兩株藻種作為深入研究的材料。通過(guò)測(cè)定藻珠內(nèi)細(xì)胞生物量的變化,研究固定化對(duì)藻生長(zhǎng)的影響。同時(shí)運(yùn)用單因子實(shí)驗(yàn)方法和均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)
3、行固定化條件優(yōu)化。優(yōu)化的固定化條件包括氯化鈣濃度、海藻酸鈉濃度、藻珠大小、接種量等。得到適于兩種海洋微藻固定化的條件是:3%海藻酸鈉濃度、0.31 mol/L氯化鈣、1.2#針頭(藻珠d=4.4 mm±0.1 mm)、10<'6>cell/mL接種量。研究結(jié)果為海洋微藻的進(jìn)一步規(guī)模固定化培養(yǎng)與應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參數(shù)與可資借鑒的方法。 2、以三種不同類型的藻種為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行固定化培養(yǎng),從形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理生化上研究固定化對(duì)藻細(xì)胞的影響。運(yùn)用
4、透射電子顯微技術(shù)對(duì)固定化微藻細(xì)胞進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察,借用熒光顯微技術(shù)和激光掃描共聚焦技術(shù)對(duì)固定化藻細(xì)胞的生理活性進(jìn)行研究,結(jié)合測(cè)定藻細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物胞內(nèi)多糖含量和蛋白質(zhì)含量的變化,探討固定化培養(yǎng)對(duì)藻細(xì)胞形態(tài)和生理生化的影響。為海洋微藻固定化培養(yǎng)與研究提供理論依據(jù)3、將六株固定化海洋微藻引入西施舌幼蟲和幼貝人工育苗養(yǎng)殖環(huán)境,通過(guò)測(cè)定水體中氨氮和亞硝酸氮含量的變化,測(cè)量幼蟲和幼貝的生長(zhǎng)量,研究固定化藻珠對(duì)育苗水體水質(zhì)的調(diào)控作用以及對(duì)幼苗成活率與
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