微顆粒紫菜粉在枝角類培養(yǎng)中的應(yīng)用研究.pdf

1、枝角類又簡稱“溞類”、“水溞”，俗稱“紅蟲”，隸屬于節(jié)肢動物門（Arthropoda），甲殼綱（Crustacea），鰓足亞綱（Babchiopoda），枝角目（Cladocera），廣泛分布于淡水、海水和內(nèi)陸半咸水中。枝角類對食物的選擇是關(guān)系生長、生殖過程一個(gè)極其重要的因素，枝角類傳統(tǒng)人工培養(yǎng)中一般以單細(xì)胞藻類、酵母、Banta液等作為餌料，比較費(fèi)工費(fèi)時(shí)，而以微顆粒紫菜粉作為枝角類餌料是一項(xiàng)新的嘗試。研究結(jié)果可以為今后用紫菜粉大量培養(yǎng)

2、枝角類提供理論依據(jù)。
　　本研究于2012年6月至2013年9月間，研究了枝角類對紫菜粉的利用機(jī)制；探索微顆粒紫菜粉對枝角類的種群變化及生殖的影響；用GC/MS法分析比較了紫菜粉、小球藻、酵母、Banta液（牛糞1.5g+干稻草2g+沃土20g+水1000 cm3）4種食物條件下蚤狀溞的脂肪酸組成；分析了紫菜粉投喂下蚤狀溞對銅、鎘毒性不良環(huán)境的適應(yīng)能力；檢測了紫菜粉投喂下的蚤狀溞、蒙古裸腹溞SOD與POD酶活力大小。獲得的研究結(jié)果

3、總結(jié)如下：
　?。?）實(shí)驗(yàn)證實(shí)微顆粒紫菜粉在培養(yǎng)枝角類的過程中發(fā)生自然酶解，酶解微生物普遍存在于環(huán)境中，水源微生物占主導(dǎo)作用，72h時(shí)其降解能力是空氣和藻源微生物的3倍，是溞源微生物的2倍。
　?。?）研究發(fā)現(xiàn)，枝角類不能利用紫菜粉酶解后的單糖等營養(yǎng)物質(zhì)，而是利用粒徑小于25um的細(xì)胞碎片及原生質(zhì)體等。
　　（3）通過觀察紫菜粉及其酶解液投喂后蚤狀溞和蒙古裸腹溞種群生長與生殖狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)直接投喂紫菜粉0.15mg/ml時(shí)

4、蚤狀溞種群增長最快，峰值密度為5.5ind/ml，與對照組差異不顯著（p＞0.05），凈生殖力最大為72ind，僅為對照組的70％，蚤狀溞的最大內(nèi)稟增長率也出現(xiàn)在0.15mg/ml組，為1.6ind/d，與對照組無顯著差異；蒙古裸腹溞0.075mg/ml組種群增長最快，峰值為0.9ind/ml，只有對照組的1/5（p＜0.05），0.75%組凈生殖力最大，為14.67 ind，僅為小球藻組1/2，最大內(nèi)稟增長率在酶解液投喂0.75%組，

5、且與對照組有顯著差異（p＜0.05）。因此認(rèn)為紫菜粉可作為蚤狀溞的合適餌料，但不能用于蒙古裸腹溞培養(yǎng)。
　?。?）用GC/MS法分析比較了紫菜粉、小球藻、酵母、Banta液4種食物條件下蚤狀溞的脂肪酸組成。結(jié)果表明，蚤狀溞的總脂含量依次為39.80mg/g、60.10mg/g、44.60mg/g、52.30mg/g。一共檢測出脂肪酸14種，其中8種飽和脂肪酸（SFA），2種單不飽和脂肪酸（MUFA），4種多不飽和脂肪酸（PUFA）

6、。紫菜粉培養(yǎng)組PUFA含量顯著高于酵母組和Banta液組（P＜0.05），占總脂肪酸的1/3以上，酵母組MUFA含量最高（P＜0.05），達(dá)55.73%，Banta液組以SFA含量最高（P＜0.05），為52.45%。其中紫菜粉組的PUFA中缺乏C18:3，但C20:5（EPA）和C20:4（AA）百分含量高達(dá)22.67%和9.02%是小球藻組的1.6倍和4.5倍（P＜0.05），而且EPA和 AA的實(shí)際含量也顯著高于小球藻組（P＜0.

7、05），達(dá)到9.02mg/g和3.59mg/g；實(shí)驗(yàn)證實(shí)紫菜粉投喂的蚤狀溞脂肪酸營養(yǎng)較高。
　?。?）分析Cu2+、Cd2+對紫菜粉投喂下蚤狀溞的影響，得到其24h、48h、72h、96h Cu2+對蚤狀溞的半致死濃度分別為293.3ug/l、192.4ug/l、127.1ug/l和90.5ug/l；Cd2+的半致死濃度分別為432.1 ug/l、191.4 ug/l、135.7 ug/l、79.8 ug/l；Cu2+、Cd2+9

8、6h的安全濃度分別為0.9ug/l、0.798ug/l；蚤狀溞的產(chǎn)仔量隨 Cu2+、Cd2+濃度增加而逐漸減少，Cu2+達(dá)到1.0ug/l時(shí)，存活周期、產(chǎn)仔總量、產(chǎn)仔胎數(shù)等指標(biāo)顯著降低（p＜0.05）；Cd2+達(dá)到5ug/l時(shí)，也出現(xiàn)明顯的下降。紫菜粉投喂下蚤狀溞對 Cu2+、Cd2+耐受力不及對照組，表明紫菜粉投喂下蚤狀溞對環(huán)境Cu2+、Cd2+的檢測更加敏感。
　　（6）通過對紫菜粉投喂下蚤狀溞、蒙古裸腹溞SOD、POD活力的

9、檢測，發(fā)現(xiàn)紫菜粉投喂組的SOD和POD活力顯著高于小球藻投喂組（p＜0.05）；在一定時(shí)間范圍內(nèi)紫菜粉投喂的蚤狀溞和蒙古裸腹溞隨饑餓時(shí)間延長SOD活力顯著升高，而蚤狀溞POD活力下降，蒙古裸腹溞POD活力則無顯著變化；紫菜粉投喂下蚤狀溞CuZn-SOD基因的相對表達(dá)量與SOD活力想對應(yīng)，顯著高于小球藻投喂組（p＜0.05）。與認(rèn)為紫菜粉投喂下蚤狀溞抗氧化能力強(qiáng)于小球藻培養(yǎng)。
　　綜合以上多項(xiàng)研究結(jié)果，可以認(rèn)為微顆粒紫菜粉完全可以替