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文檔簡介
1、目的:探討血清和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)表面瘦素及其受體在免疫介導(dǎo)再生障礙性貧血小鼠發(fā)病過程中的變化及意義。
方法:建立免疫介導(dǎo)再生障礙性貧血小鼠模型,分別于建模第0,3,6,9,12,15,18天檢測(cè)血常規(guī),CD4+T、CD8+T細(xì)胞亞群比例,IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5等指標(biāo)變化,行骨髓活檢病理學(xué)檢查,判斷模型成功與否。造模后采用ELISA方法檢測(cè)血清瘦素及其可溶性
2、瘦素受體、免疫組化法檢測(cè)骨髓瘦素受體、實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)骨髓MSC表面瘦素、瘦素受體和骨髓成脂成骨基因變化。對(duì)血清瘦素和瘦素受體與免疫指標(biāo)、血象指標(biāo)之間的相關(guān)性及骨髓MSC表面瘦素及其受體與成脂成骨基因的相關(guān)性進(jìn)行分析。
結(jié)果:
?。?)小鼠造模后外周血三系迅速降低;IL-2、IFN-γ水平逐漸升高,IL-4、IL-5、CD4+T/CD8+T比值逐漸下降。骨髓活組織檢查示造血組織逐漸被脂肪組織取代。造模成功。<
3、br> ?。?)血清瘦素逐漸上升、瘦素受體逐漸下降。血清瘦素與Th1相關(guān)細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ呈顯著正相關(guān),與Th2相關(guān)細(xì)胞因子、CD4+T/CD8+T比值及血象呈顯著負(fù)相關(guān)。而瘦素受體與之相反。
?。?)在微環(huán)境中,骨髓MSC表面瘦素逐漸上升、瘦素受體逐漸下降。骨髓脂肪化程度逐漸加重,成脂基因C/EBPα、C/EBPβ、PPARγ表達(dá)逐漸升高,成骨基因RUNx2逐漸表達(dá)下降。瘦素基因表達(dá)與成脂基因表達(dá)呈正相關(guān),與成骨基因
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