低強(qiáng)度雙波長激光治療儀的研制和激光照射對巨噬細(xì)胞功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　低強(qiáng)度激光生物刺激效應(yīng)在傷口愈合和組織修復(fù)上的作用，明確指出了低強(qiáng)度激光生物刺激效應(yīng)能影響多種細(xì)胞的功能行為，而且可能同時(shí)產(chǎn)生這些影響。但是，低強(qiáng)度激光生物刺激效應(yīng)的確切機(jī)制目前仍然不清楚。為闡明低強(qiáng)度激光生物刺激效應(yīng)的機(jī)制，需要更多細(xì)胞和分子水平的深入研究。激光輻照的生物效應(yīng)取決于激光的波長、功率和照射劑量等。迄今為止，研究激光輻照巨噬細(xì)胞的生物效應(yīng)實(shí)驗(yàn)多采用He-Ne激光，而650nm、532nm波長激光卻很少涉及

2、。本論文擬研制能夠輸出兩種波長激光的雙波長半導(dǎo)體激光治療儀，然后建立一種小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法，進(jìn)而研究低強(qiáng)度650nm、532nm激光輻照對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響。
　　方法：
　?、烹p波長半導(dǎo)體激光治療儀采用單片機(jī)AT89S51智能控制，通過人機(jī)對話接口實(shí)現(xiàn)對輸出功率、工作時(shí)間的連續(xù)調(diào)節(jié)；⑵用不含小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液灌洗小鼠腹腔，分離獲取小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，在含有10％小牛血清的RPMI-164

3、0培養(yǎng)液中培養(yǎng)。采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，臺盼藍(lán)染色計(jì)算存活率，瑞氏染色計(jì)算純度；⑶用不同功率和照射時(shí)間的650nm、532nm激光輻照小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，采用中性紅吞噬實(shí)驗(yàn)測定小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力；⑷用10mW的低強(qiáng)度650nm、532nm激光輻照小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，時(shí)間分別為1d、3d、5d、7d、9d，每天照射10min，采用比色法測定小鼠腹腔巨噬細(xì)胞LDH和ACP活性。
　　結(jié)果：
　?、烹p波長半導(dǎo)體激光治療儀可

4、以輸出650nm、532nm兩種波長激光，輸出功率、工作時(shí)間連續(xù)可調(diào)；⑵論文設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方法獲得的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞純度較高，具備巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征；⑶在適當(dāng)?shù)募す夤β屎驼丈鋾r(shí)間時(shí)，小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力有顯著性增強(qiáng)，并且相同功率的低強(qiáng)度650nm、532nm激光照射后小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力隨照射時(shí)間的變化規(guī)律相似，532nm激光照射后的巨噬細(xì)胞吞噬能力強(qiáng)于650nm激光；⑷低強(qiáng)度650nm、532nm激光照射后小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的LD

5、H和ACP活性顯著增強(qiáng)，并且LDH和ACP活性隨照射時(shí)間的增加呈先增大后減小的趨勢，在7d時(shí)達(dá)到最大，9d時(shí)減小。
　　結(jié)論：
　?、叛兄频碾p波長半導(dǎo)體激光治療儀能夠輸出兩種波長激光，輸出功率和工作時(shí)間可以連續(xù)調(diào)節(jié)，體積小、操作簡單，適用于臨床照射治療,具有非常好的應(yīng)用前景；⑵所設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方法能獲得較高純度的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，是一種簡便實(shí)用的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離培養(yǎng)方法；⑶實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明適當(dāng)劑量的低強(qiáng)度650nm、532nm激