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文檔簡介
1、PCV2能夠引起母豬和仔豬發(fā)病,嚴重制約著中國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,本文利用PCR方法,設計引物。對2015年9月到2016年12月期間采集河北山西不同地區(qū)的73份疑似豬圓環(huán)病毒病(PCVD)病料進行檢測,在河北省收集到68份疑似病料,檢測到陽性病料41份,陽性率為60.29%。期間。也在山西省收集到5份疑似病料,其中陽性病料3份,設計引物對這44份陽性病料進行全基因克隆,得到13株PCV2的全基因,并對13株病毒毒株進行克隆、測序后,將其中的
2、12株序列上傳到Genebank上,登錄號分別為KX845692、KX845693、KX845694、KX845695、KY126311、KY126312、KY126313、KY126315、KY126317、KY425814和KY425815。從Genebank上下載27株PCV2基因序列,運用DNAstar進行基因核苷酸對分析和發(fā)現(xiàn):從河北分離得到的11株毒株的同源性在95.6%~99.9%之間,其中KX845694、KX84569
3、5、KX845692、PCV2-DG、KY126311中國株HX1(登錄號KJ956690)的同源性最高,分別為99.9%、99.7%、99.7%、100%、99.6%和99.8%。KY126312、KY126315和KY126317株與美國株22625-33(登錄號JX535296)的核苷酸同源性最高,分別為99.8%、99.8%和98.6%。這說明這三株毒株可能來源于美國。而從山西分離出的兩株PCV2毒株,KY126313株與美國株
4、22625-33(登錄號JX535296)、中國株AH(登錄號HM038030)、中國株BDH(登錄號HM038017)的同源性高達99.8%。而另一株KY126314與中國株HX1(登錄號KJ956690)和BH6(登錄號KJ956689)的同源性達到99.8%。山西省分離得到的兩株毒株的同源性為96.3%。利用軟件MEGA(7.0)構建基因進化樹后發(fā)現(xiàn)分離得到的13株PCV2毒株中其中6株與PCV2d同屬于一個分支,屬于PCV2d。
5、而其剩下的7株與PCV2b在同一個分支。從得到的PCV2全基因進化分析來看,河北山西兩地同時流行著PCV2b和PCV2d兩種基因型。為河北山西兩地地區(qū)PCVD的流行情況以及疫苗選擇提供參考。
為了解2015年9月到2017年2月期間河北省不同養(yǎng)殖場的PCV2流行情況,利用ELISA方法對收集到的1280份血樣進行經(jīng)檢測,其中陽性份數(shù)為921份,河北省的PCV2抗體的陽性率為71.95%,普遍存在PCV2的感染。通過對PCV2抗
6、體陽性率隨時間的統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)PCV2一年四季均可感染,并且在此時間段內,PCV2的感染率呈現(xiàn)出一個先上升后下降然后趨于平穩(wěn)的趨勢。通過對PCV2抗體隨不同生長階段的統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),PCV2的感染率隨著仔豬日齡的增加,先下降后上升最后處于較高的感染水平,到140日齡以后,PCV2的感染率最高。在2016年3月到5月份,豬群的抗體陽性率最低。在28d~70d日齡時PCV2的抗體陽性率最低為49.73%。仔豬群中的PCV2抗體陽性率隨著日齡的增
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