混合花粉授粉茶樹雜交F-,1-代AFLP分析及優(yōu)株選擇.pdf

1、該項(xiàng)目選擇以國(guó)家級(jí)茶樹良種櫧葉齊、福鼎大白茶、白毫早、龍井43為父本，省級(jí)茶樹良種湘波綠為母本，1980年取父本花粉等量混合雜交授粉所獲得的F<,1>代79個(gè)單株為實(shí)驗(yàn)材料，應(yīng)用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)和茶樹育種中常用的優(yōu)株選擇方法對(duì)其進(jìn)行了研究，得到以下主要研究結(jié)果： 1.本項(xiàng)研究通過AFLP分子標(biāo)記技術(shù)聚類分析對(duì)其F<,1>代各單株的父本進(jìn)行了初步鑒定認(rèn)為：使用AFLP分子標(biāo)記方法多態(tài)性高、重復(fù)性好，使用EO/MO預(yù)擴(kuò)、5對(duì)選擴(kuò)

2、引物(E41/M42，E41/M55，E42/M34，E43/M42，E44/M33)可以將混合花粉授粉茶樹雜交F<,1>代79個(gè)單株區(qū)分開來，是適用于混合花粉授粉茶樹雜交后代親子鑒定的方法。 2.采用數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件DPS2000中的UPGMA法對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，得到了根據(jù)遺傳距離建立的聚類圖。在遺傳距離為0.76處取結(jié)合線，可將所有材料分為4個(gè)類組，認(rèn)為父本為櫧葉齊的有37個(gè)單株：8、9、11、12、13、15、16、

3、19、21、25、27、28、30、39、40、41、43、44、47、49、50、54、55、56、57、61、65、66、67、69、70、71、72、75、77、78、79號(hào)。父本為龍井43的單株有15個(gè)：2、4、7、14、17、23、26、29、32、36、60、62、63、64、73號(hào)。父本是福鼎大白茶的有15個(gè)單株：1、3、10、18、22、24、31、38、45、46、48、59、68、74、76號(hào)。父本為白毫早的最少，有

4、12個(gè)單株：5、6、20、33、34、35、37、42、51、52、53、58號(hào)。為混合花粉授粉茶樹雜交后代進(jìn)行品種比較實(shí)驗(yàn)時(shí)對(duì)照父本品種的確定提供了確切的依據(jù)和方法。 3.AFLP聚類分析結(jié)果將混合花粉授粉茶樹雜交的4個(gè)父本完全分開，其F<,1>代79個(gè)單株分別歸于4個(gè)父本所在的類群里，其中龍井43與湘波綠出現(xiàn)的總條帶數(shù)為395條，其F<,1>代15個(gè)單株出現(xiàn)與父母本相異的條帶數(shù)最多的達(dá)到19條，最少的僅有5條，F(xiàn)<,1>群體

5、與父母本總的相異條帶數(shù)為41條，即該組合雙親的AFLP譜帶在其F<,1>代中的總表現(xiàn)率為89.62％，其它組合及后代有類似表現(xiàn)，這既說明各單株是其親本的真正后代，同時(shí)又表明混合花粉授粉茶樹雜交F<,1>代較單一父本雜交的分離度更大，產(chǎn)生新的變異類型更多。 4.AFLP聚類分析結(jié)果表明，混合授粉法確實(shí)可以提高雜交的可孕性，改變親本間的親和力，為品種與種質(zhì)創(chuàng)新提供了更多可能途徑。根據(jù)雜交檔案記載，本實(shí)驗(yàn)材料的結(jié)實(shí)率為28.8％，高于

6、各父本分別雜交的結(jié)實(shí)率，證明混合授粉法可提高雜交的可孕性，相應(yīng)提高選種效率。母本湘波綠與父本中的櫧葉齊、白毫早都來源于安化群體，其親緣關(guān)系近，在非混合花粉授粉時(shí)雜交親和力是不高的，但本實(shí)驗(yàn)AFLP聚類分析表明，以與母本親緣關(guān)系近的櫧葉齊為父本的單株數(shù)最多，達(dá)37個(gè)，占總單株數(shù)的46.8％，顯著高于親緣關(guān)系遠(yuǎn)的龍井43和福鼎大白茶(均為19.0％)，櫧葉齊成為該雜交組合中的優(yōu)勢(shì)父本。這種變化可供今后進(jìn)行混合花粉授粉雜交親本選配時(shí)參考。

7、 5.根據(jù)已有的早期單株鑒定及遺傳研究成果，對(duì)這一雜交組合選擇生長(zhǎng)勢(shì)、分枝角度、營(yíng)養(yǎng)芽物候期、成熟葉片及芽葉特征等形態(tài)特征，茶多酚、氨基酸、水浸出物含量等生化成分進(jìn)行了較系統(tǒng)的比較分析，結(jié)合所得的AFLP分析結(jié)果進(jìn)行了優(yōu)株選拔，確定了14個(gè)優(yōu)株進(jìn)入下一步試驗(yàn)：2，4，6，9，11，13，18，19，29，51，62，70，73，74。這其中父本為櫧葉齊的第13號(hào)單株的多項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于其它單株，甚至有超雙親優(yōu)勢(shì)，說明櫧葉齊等與湘波綠親緣