人早孕絨毛組織間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性鑒定及其在大鼠心梗修復(fù)中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：日期：型q生人早孕絨毛組織問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性鑒定及其在大Itt警梗修復(fù)中作用的實(shí)驗(yàn)研

2、究中文摘要中文摘要目的：建立人6—8周新鮮早孕絨毛組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymalstemcellsderivedfromfirsttrimesterchorionicvilli，F(xiàn)CMSCs)及足月胎盤絨毛來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymalstemcellsderivedfromtermchorionicmembrane，TcMscs)體外擴(kuò)增體系，體外比較人F—CMSCs、TCMSCs向多種細(xì)胞分化的潛能及形成毛

3、細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)能力。建立大鼠心肌梗死模型兩周后，經(jīng)開(kāi)胸在左心室壁梗死區(qū)及邊緣區(qū)注射人F—CMSCs、TCMSCs，觀察其改善心功能的效果，進(jìn)一步研究其作用機(jī)制。方法：選取正常健康孕婦68周的藥流術(shù)排出的新鮮早孕絨毛組織、剖腹產(chǎn)足月胎兒的胎盤組織，分離培養(yǎng)人FCMSCs、TCMSCs細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)人F—CMSCs、TCMSCs細(xì)胞表型、特異性染色檢測(cè)人FCMSCs、TCMSCs三系分化潛能、毛細(xì)血管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人兩群MSC細(xì)胞體外成血

4、管能力：本實(shí)驗(yàn)采用結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈前降支的方法建立大鼠心肌梗死模型，建模成功兩周后，開(kāi)胸在心室壁梗死區(qū)及周圍區(qū)行細(xì)胞移植。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為三組：空白對(duì)照組；TCMSCs移植組；F—CMSCs移植組。細(xì)胞移植四周后，熒光顯微鏡下觀察GFPF—CMSCs細(xì)胞在大鼠局部心梗區(qū)存活情況，超聲心動(dòng)圖檢查觀察大鼠心臟功能的改善情況。結(jié)果：1流式細(xì)胞檢測(cè)表明，培養(yǎng)的P3代人FCMSCs、TCMSCs均高表達(dá)CD73、CD90、CDl05，不表達(dá)血系細(xì)胞

5、標(biāo)志CDl4、CD34、HLADR，不表達(dá)滋養(yǎng)細(xì)胞標(biāo)志CKl8。2三系分化潛能測(cè)定表明人F—CMSCs具有和人TCMSCs相似的分化潛能，經(jīng)成骨誘導(dǎo)后VOIlKossa染色可見(jiàn)細(xì)胞呈集落生長(zhǎng)并出現(xiàn)鈣結(jié)節(jié)；經(jīng)成脂肪誘導(dǎo)，細(xì)胞內(nèi)有明顯的脂滴出現(xiàn)，油紅O染色陽(yáng)性；經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)，甲苯胺藍(lán)染色可見(jiàn)細(xì)胞被染成藍(lán)色。3流式細(xì)胞儀分析表明，體外培養(yǎng)的人FCMSCs表達(dá)VEGF受體l，2即FLT1和KDR，向內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)后，人FCMSCs表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志