葡多酚對(duì)胰腺細(xì)胞增殖活性的影響作用研究.pdf

1、　　目的:葡多酚(Grapeprocyanidins，GPC)是從葡萄籽中提取的天然植物多酚類物質(zhì)。國內(nèi)外研究報(bào)道具有抗氧化、抗自由基、抗輻射、抗腫瘤等多種生物學(xué)功效。本研究以小鼠胰腺細(xì)胞為模型，通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩種方法，觀察GPC對(duì)正常胰腺細(xì)胞和受損傷胰腺細(xì)胞增殖活性的影響作用　　方法:1.體外實(shí)驗(yàn)：GPC對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠胰腺細(xì)胞增殖活性的影響取小鼠正常胰腺細(xì)胞與不同濃度的GPC共同體外培養(yǎng)，再分別加入H2O2和葡萄糖，產(chǎn)生氧

2、自由基和氧化代謝產(chǎn)物從而影響胰腺細(xì)胞的增殖活性，用MTT法觀察GPC對(duì)氧自由基引發(fā)的胰腺細(xì)胞增殖活性損傷的保護(hù)作用、GPC對(duì)高糖環(huán)境下胰腺細(xì)胞增殖活性的影響以及GPC對(duì)正常胰腺細(xì)胞增殖活性的影響?！　?.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：GPC對(duì)小鼠胰腺細(xì)胞增殖活性急性與亞慢性輻射損傷的防護(hù)　　2.1GPC對(duì)小鼠胰腺細(xì)胞增殖活性急性輻射損傷的防護(hù)健康昆明種小鼠每日空腹灌胃GPC，每天1次，連續(xù)5天(低劑量組50mg/kg，高劑量組150mg/kg)。末次灌

3、胃后第2天，用60Co-γ射線進(jìn)行1次全身性輻照，小鼠單次照射總吸收劑量為5.0Gy，輻照后第2天放血處死動(dòng)物，取胰腺制備細(xì)胞懸液，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性，計(jì)算細(xì)胞增殖率；用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率；用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)bcl-2和bax蛋白的表達(dá)。　　2.2GPC對(duì)小鼠胰腺細(xì)胞增殖活性亞慢性輻射損傷的防護(hù)健康昆明種小鼠灌胃給予GPC(低劑量組50mg/kg，高劑量組150mg/kg)，每天1次，連續(xù)4周，期間用60Co-γ射線

4、進(jìn)行輻照，每周5次，連續(xù)4周，小鼠單次照射吸收劑量為0.125Gy，總劑量為2.5Gy。末次輻照后第2天處死動(dòng)物，取胰腺用MTT法測(cè)定細(xì)胞的增殖活性，計(jì)算細(xì)胞增殖率；用電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化；用免疫組化染色試劑盒檢測(cè)bcl-2和bax蛋白的表達(dá)?！　〗Y(jié)論:1GPC對(duì)正常胰腺細(xì)胞的增殖活性有一定促進(jìn)作用?！　?GPC可抑制氧自由基、高糖及輻射對(duì)胰腺細(xì)胞增殖活性的損傷。　　3.本實(shí)驗(yàn)為葡多酚在預(yù)防和治療胰腺疾病方面的功效研究和開發(fā)