兩種不同構(gòu)型的甘草酸對鎘染毒小鼠肝臟損傷的干預作用.pdf

1、目的：本研究旨在通過鎘染毒小鼠模型觀察不同構(gòu)型甘草酸對鎘染毒造成的肝臟損傷的干預作用，從而探討18α甘草酸，18β甘草酸兩種構(gòu)型對肝臟損傷的不同程度的作用，以期為深入闡明鎘肝毒性的作用機制及尋求鎘中毒有效的治療方法。
　　方法：SPF級昆明種雄性小鼠72只，按照體重隨機分為6組。分別為空白對照組，模型組（單純?nèi)炬k組），18α甘草酸低劑量組，18α甘草酸高劑量組，18β甘草酸低劑量組，18β甘草酸高劑量組，除空白組外其余各組腹腔注射

2、氯化鎘2.5mg/kg，每天一次，每次給予0.2ml，連續(xù)染毒20天，空白組腹腔注射0.9％的生理鹽水。染毒的同時，低劑量組分別灌胃18α甘草酸40mg/kg，18β甘草酸30mg/kg，高劑量組分別灌胃18α甘草酸80mg/kg，18β甘草酸60mg/kg，空白組和模型組灌胃與之前等體積的生理鹽水。每天一次，連續(xù)給藥6周。往實驗小鼠的腹腔內(nèi)注射水合氯醛使其安靜的死亡，摘取肝臟，分別測定：1小鼠體重。2病理形態(tài)學指標：按常規(guī)方法取材，將

3、組織浸泡于裝有福爾馬林的容器內(nèi)，按照規(guī)定的步驟HE染色，光鏡觀察肝組織的損傷情況。用戊二醛固定組織，以備透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)。3用流式細胞儀測定小鼠的肝臟凋亡細胞，進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計并分析，結(jié)果以凋亡細胞的百分數(shù)來表示。4測定小鼠肝臟組織谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的活力，按照試劑盒的說明要求進行操作。
　　數(shù)據(jù)處理：采用 SPSS Statistics V17.0統(tǒng)計學軟件，數(shù)據(jù)均用（(x)±s）表示，此實驗多組間的比較

4、我們采用的是單因素方差分析，兩個組之間的比較采用的是LSD檢驗。
　　結(jié)果：鎘染毒小鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力明顯高于空白組，說明鎘染毒后對肝臟造成了嚴重的損傷，18α甘草酸和18β甘草酸給藥組較單純?nèi)炬k組都能夠降低小鼠肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活力，并且從所得的數(shù)據(jù)可以明顯看出18α甘草酸給藥組比18β甘草酸給藥組降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的作用要強，且高劑量組的作用強于低劑量組。因此我們認為甘草酸對鎘染毒小鼠的肝臟具有

5、干預作用，且可能成劑量—效應關(guān)系?？瞻捉M小鼠體重增長的很快，鎘染毒組小鼠體重增長的很慢，四個甘草酸干預組與鎘染毒組相比體重的增長速度都有不同程度的增加。從病理切片可觀察：鎘染毒組小鼠的肝臟細胞大面積的破壞，而給藥組情況有不同程度的好轉(zhuǎn)，這可能與甘草酸對肝臟細胞膜的保護作用有關(guān)，主要的方式是穩(wěn)定線粒體膜，那么就會減輕脂質(zhì)過氧化的強弱程度，另一種可能的途徑是通過誘導肝臟組織中的氧自由基清除劑來抑制氧自由基損傷，這樣可以起到保護肝臟的作用。鎘

6、染毒組小鼠肝臟細胞凋亡率明顯高于其他各組，而4個給藥組的凋亡率與鎘染毒組相比(P<0.05),具有統(tǒng)計學意義，且兩兩組間的凋亡率通過進行 LSD檢驗得出(P<0.05),具有統(tǒng)計學意義。通過透射電鏡觀察的結(jié)果：正常的細胞核為圓形或長圓形，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，呈層狀分布，存在豐富的糖原。鎘染毒組：細胞皺縮和染色體聚集，細胞核內(nèi)的染色質(zhì)濃縮，邊移，聚集在核膜下，部分線粒體的嵴消失。18α高劑量組的核膜邊緣較圓整，核仁皺縮的程度很小，線粒體的形狀