兩種不同構(gòu)型的甘草酸對(duì)鎘染毒小鼠肝臟損傷的干預(yù)作用.pdf

1、目的：本研究旨在通過(guò)鎘染毒小鼠模型觀察不同構(gòu)型甘草酸對(duì)鎘染毒造成的肝臟損傷的干預(yù)作用，從而探討18α甘草酸，18β甘草酸兩種構(gòu)型對(duì)肝臟損傷的不同程度的作用，以期為深入闡明鎘肝毒性的作用機(jī)制及尋求鎘中毒有效的治療方法。
　　方法：SPF級(jí)昆明種雄性小鼠72只，按照體重隨機(jī)分為6組。分別為空白對(duì)照組，模型組（單純?nèi)炬k組），18α甘草酸低劑量組，18α甘草酸高劑量組，18β甘草酸低劑量組，18β甘草酸高劑量組，除空白組外其余各組腹腔注射

2、氯化鎘2.5mg/kg，每天一次，每次給予0.2ml，連續(xù)染毒20天，空白組腹腔注射0.9％的生理鹽水。染毒的同時(shí)，低劑量組分別灌胃18α甘草酸40mg/kg，18β甘草酸30mg/kg，高劑量組分別灌胃18α甘草酸80mg/kg，18β甘草酸60mg/kg，空白組和模型組灌胃與之前等體積的生理鹽水。每天一次，連續(xù)給藥6周。往實(shí)驗(yàn)小鼠的腹腔內(nèi)注射水合氯醛使其安靜的死亡，摘取肝臟，分別測(cè)定：1小鼠體重。2病理形態(tài)學(xué)指標(biāo)：按常規(guī)方法取材，將

3、組織浸泡于裝有福爾馬林的容器內(nèi)，按照規(guī)定的步驟HE染色，光鏡觀察肝組織的損傷情況。用戊二醛固定組織，以備透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)。3用流式細(xì)胞儀測(cè)定小鼠的肝臟凋亡細(xì)胞，進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)并分析，結(jié)果以凋亡細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)來(lái)表示。4測(cè)定小鼠肝臟組織谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的活力，按照試劑盒的說(shuō)明要求進(jìn)行操作。
　　數(shù)據(jù)處理：采用 SPSS Statistics V17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，數(shù)據(jù)均用（(x)±s）表示，此實(shí)驗(yàn)多組間的比較

4、我們采用的是單因素方差分析，兩個(gè)組之間的比較采用的是LSD檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：鎘染毒小鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力明顯高于空白組，說(shuō)明鎘染毒后對(duì)肝臟造成了嚴(yán)重的損傷，18α甘草酸和18β甘草酸給藥組較單純?nèi)炬k組都能夠降低小鼠肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活力，并且從所得的數(shù)據(jù)可以明顯看出18α甘草酸給藥組比18β甘草酸給藥組降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的作用要強(qiáng)，且高劑量組的作用強(qiáng)于低劑量組。因此我們認(rèn)為甘草酸對(duì)鎘染毒小鼠的肝臟具有

5、干預(yù)作用，且可能成劑量—效應(yīng)關(guān)系?？瞻捉M小鼠體重增長(zhǎng)的很快，鎘染毒組小鼠體重增長(zhǎng)的很慢，四個(gè)甘草酸干預(yù)組與鎘染毒組相比體重的增長(zhǎng)速度都有不同程度的增加。從病理切片可觀察：鎘染毒組小鼠的肝臟細(xì)胞大面積的破壞，而給藥組情況有不同程度的好轉(zhuǎn)，這可能與甘草酸對(duì)肝臟細(xì)胞膜的保護(hù)作用有關(guān)，主要的方式是穩(wěn)定線粒體膜，那么就會(huì)減輕脂質(zhì)過(guò)氧化的強(qiáng)弱程度，另一種可能的途徑是通過(guò)誘導(dǎo)肝臟組織中的氧自由基清除劑來(lái)抑制氧自由基損傷，這樣可以起到保護(hù)肝臟的作用。鎘

6、染毒組小鼠肝臟細(xì)胞凋亡率明顯高于其他各組，而4個(gè)給藥組的凋亡率與鎘染毒組相比(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且兩兩組間的凋亡率通過(guò)進(jìn)行 LSD檢驗(yàn)得出(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過(guò)透射電鏡觀察的結(jié)果：正常的細(xì)胞核為圓形或長(zhǎng)圓形，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，呈層狀分布，存在豐富的糖原。鎘染毒組：細(xì)胞皺縮和染色體聚集，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)濃縮，邊移，聚集在核膜下，部分線粒體的嵴消失。18α高劑量組的核膜邊緣較圓整，核仁皺縮的程度很小，線粒體的形狀