基于多糖接枝聚天冬氨酸構建新型可降解基因載體.pdf

1、基因治療(Gene therapy)在治療先天基因缺陷以及獲得性疾病方面展現出巨大的潛力。基因治療依賴于安全高效的基因載體，基因載體通常分為病毒性載體和非病毒性載體兩大類。兩者相比，非病毒性基因載體無傳染性，載體容量大，結構容易控制，適合大規(guī)模生產，毒性低、免疫反應低，但是現有的基因載體轉染效率還不夠理想。因此，發(fā)展安全高效的非病毒性載體仍面臨著挑戰(zhàn)。
　　天然多糖可再生，生物相容性良好，基于多糖構建基因載體是設計安全高效載體的一

2、種有效手段。聚天冬氨酸(Poly(aspartic acid))毒性低，生物相容性好，易生物降解，是制備基因載體的理想材料。本文研究內容如下:
　　1、我們首先以環(huán)糊精(Cyclodextrin，CD)、葡聚糖(Dextran)和殼聚糖(Chitosan，CS)為代表探究了一種多糖接枝聚天冬氨酸的普適性方法。以乙二胺(Ethylene diamine，ED)修飾的CD和Dextran以及本身含有-NH2的CS為引發(fā)劑，引發(fā)單體天冬

3、氨酸-β-芐酯-N-羰基內酸酐(BLA-NCA)的開環(huán)聚合反應得到多糖接枝聚天冬氨酸芐酯聚合物(Polysaccharide-PBLA)，再通過ED與Polysaccharide-PBLA上芐基的胺解反應構建了一系列基因載體（Polysaccharide-PAsp-ED）。通過降解，細胞毒性，海腎熒光素酶等實驗證明Polysaccharide-PAsp-ED具有良好的降解性，較低的毒性，尤其是基于殼聚糖的基因載體具有較優(yōu)異的轉染效率。<

4、br>　　2、為進一步提高基因載體的轉染效率，構建具有靶向性的基因載體，我們又進行了下面的課題。在CS上引入了CD，形成CS-CD多糖骨架，以通過ED修飾的CS-CD為引發(fā)劑，引發(fā)單體BLA-NCA的開環(huán)聚合反應，得到CS-CD-PBLA，通過與ED的胺解反應，得到陽離子聚合物CS-CD-PAsp-ED(CCPE)。通過接有葉酸(Folic acid，FA)的金剛烷胺(Adamantanamine，Ad)與CD空腔之間的自組裝賦予陽離子