貴州大葉貫眾提取物抗水皰口炎病毒有效成分的研究.pdf

1、大葉貫眾為鱗毛蕨科(Dryopteridaceae)貫眾屬植物，據(jù)《貴州蕨類植物志》記載，該植物主要分布于我國云南、四川、湖南、湖北、貴州、江西等地。在《貴州藥用植物名錄》、《貴州中藥資源》中均有收錄，其干燥根莖及葉柄殘基均可入藥，具有清熱解毒、涼血止血和抗菌之功效。藥用植物貫眾種類繁多，目前國內(nèi)外研究的焦點和熱點多集中在商品貫眾的化學成分和藥理活性上，而對貴州大葉貫眾的研究較少。所以本研究選取大葉貫眾為對象，對其進行了以下研究。

2、>　　試驗Ⅰ:大葉貫眾提取物成分的初步分析
　　為初步了解提取物的化學組成，對大葉貫眾藥用部位進行乙醇回流法提取和分部萃取，并對提取物的化學組成進行初步分析。結(jié)果表明大葉貫眾提取物中總黃酮含量約為27.6％，總酚類的含量約為30.8％，鞣質(zhì)的含量約為11.2％。使用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC/MS)對其易揮發(fā)性成分進行了檢測，證明提取物中主要含有糖醛、油酸、正十六烷酸、L-蛋氨酸和鄰苯二酚等物質(zhì)。通過高效液相色譜(HPLC)檢測，并與

3、標品對照，發(fā)現(xiàn)提取物中含有兒茶素和槲皮素-3-O-葡萄糖苷。
　　試驗Ⅱ:大葉貫眾提取物體外抗水皰口炎病毒活性研究
　　對各萃取部位進行了細胞安全濃度測試，結(jié)果表明各萃取部位的最高安全濃度為250μg·mL-1。將各萃取部位用細胞培養(yǎng)液分別從250μg·mL-1倍比稀釋至15.625μg·mL-1，5個濃度，測試體外抗水皰口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus，VSV)效果。結(jié)果表明先加各萃取部位和與

4、病毒同時加入細胞兩組中，水部位、二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位的抗病毒作用較顯著，其中水部位的抗病毒作用顯著(P＜0.05)，且濃度在125μg·mL-1時抗VSV病毒效果最好。
　　試驗Ⅲ:大葉貫眾提取物抗水皰口炎病毒有效成分的分離純化
　　通過反復硅膠柱色譜分離、高效制備液相和凝膠過濾等分離純化方法，從提取物的水部位的Fr.Ⅲ組分中分離純化出2個化合物，經(jīng)波譜技術初步鑒定分別為槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷-3'硫酸化鈉鹽