內(nèi)源性硫化氫和一氧化氮在大鼠心肌梗死后的相互作用的研究.pdf

1、近年來研究證實硫化氫對心血管系統(tǒng)有重要的生理病理作用，內(nèi)源性硫化氫/胱硫醚-γ-裂解酶(H<,2>S-CSE) 體系參與異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌損傷和急性心肌梗死的病理過程，硫化氫可以減少心肌梗死面積，保護缺血心肌。內(nèi)源性氣體分子一氧化氮(NO)被公認(rèn)為三大氣體信號分子之一(NO、H<,2>S和CO)，內(nèi)源性NO及外源性NO供體藥物均能抑制血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的增生，松弛血管，減輕心肌缺血和缺血再灌注導(dǎo)致的心肌損傷。H<,2>S與

2、NO在大鼠心肌缺血過程中都具有一定的心臟保護作用，但兩者在該病理過程中的相互作用關(guān)系至今尚未見相關(guān)報道。 本實驗采用手術(shù)的方法建立急性心肌梗死的動物模型，預(yù)給藥一周及維持給藥兩天的治療方案，分別給予H<,2>S的合成酶CSE的底物左旋半胱氨酸(L-cysteine)和CSE的抑制劑炔丙基甘氨酸(PPG)，干預(yù)動物體內(nèi)H<,2>S-CSE體系，觀察實驗動物體內(nèi)NO及NO合成酶(NOS)的變化；給予NOS的促進劑西地那非(silde

3、nafil)和其抑制劑L-NAME，影響NO-NOS體系，觀察H<,2>S-CSE體系的改變，采用生理鹽水組作為對照組。同時，利用血液動力學(xué)等方法進一步觀察上述兩個氣體信號分子對于缺血心肌的保護作用。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，給予CSE的底物L(fēng)-cysteine和NOS促進劑sildenafil的實驗組，大鼠的血壓下降，心肌梗死面積明顯低于生理鹽水組(43.1±3.52％ vs 54.77±4.43％和46.17±3.63％ vs 54.77

4、±4.43％，p<0.05)，心肌毛細(xì)血管的密度增大：105.4±1.54，110.44±2.5(生理鹽水對照組為99±6.6)。上述兩組試驗動物死亡率明顯低于生理鹽水心梗組：45.5％ vs 52.9％；41.2％ vs 52.9％，p<0.05。給予PPG和L-NAME組的心肌梗死面積則明顯高于生理鹽水心梗組(64.25±4.96％ vs 54.77±4.43％和65.68±4.93％ vs 54.77±4.43％，p<0.05)，

5、動物死亡率也明顯高于生理鹽水心梗組(63.6％，64.7％ vs 52.9％，p<0.05)，心肌毛細(xì)血管密度與生理鹽水組心梗組相比則明顯下降(83±2.6，90.1±0.4 vs 99±6.6，p<0.05)。此外，我們還觀察到：sildenafil心梗組的血漿中H<,2>S的水平低于L-NAME心梗組(42.2±2.33 μM vs 47.07±3.17μM)；L-cysteine的實驗組動物血漿的NO水平明顯低于PAG心梗組(44

6、.32±3.53μM vs 31.98±4.19μM，p<0.05)，Western Blot結(jié)果證實L-NAME心梗組的CSE蛋白的表達(dá)水平明顯高于sildenafil心梗組(1.06±0.05 vs 0.76±0.05，p<0.05)；PAG實驗組的eNOS蛋白水平高于L-cysteine心梗組(0.26±0.05 vs 0.33±0.03)，但無統(tǒng)計學(xué)差異。我們采用Real-Time PCR的方法進一步證實在mRNA水平，L-NA

7、ME心梗組的CSE的表達(dá)高于sildenafil心梗組(0.834-0.03 vs 0.79±0.06)，L-cysteine心梗組eNOS的表達(dá)水平明顯低于PAG心梗組：0.68±0.06 vs 0.89±0.07，p<0.05。 綜上所述，我們發(fā)現(xiàn)H<,2>S和NO能夠增加缺血的大鼠心肌的毛細(xì)血管密度，保護缺血的心肌組織，從而減少梗死的心肌面積，降低實驗動物的死亡率。在心肌缺血的病理生理過程中，H<,2>S-CSE體系和NO