微滲透泵恒量灌注VEGF提高大鼠脂肪移植成活率的研究.pdf

1、【目的】 脂肪移植的高吸收率是脂肪移植最大的障礙，也一直是脂肪移植研究的重點。脂肪組織游離移植以后經(jīng)歷了缺血和血運重建兩個過程，移植體與受區(qū)建立血液循環(huán)是組織存活的關(guān)鍵。血管內(nèi)皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是內(nèi)皮細胞的特異性絲裂原，可以促進內(nèi)皮細胞增殖移行，促進血管形成，同時對維持血管的正常狀態(tài)和完整性有重要意義。本實驗在大鼠自體脂肪移植模型中，通過微滲透泵將VE

2、GF持續(xù)恒量地灌注到脂肪移植體中，探討VEGF對脂肪移植的血運重建、脂肪成活率的影響，為臨床提高脂肪移植成活率提供理論依據(jù)。為解決了重組血管內(nèi)皮細胞生長因子代謝快、易吸收等問題，本實驗嘗試了微滲透泵緩釋VEGF的給藥途徑。 【方法】 健康SD大鼠90只隨機分成3組，每組30只。①手術(shù)對照組：單純行自體脂肪移植；②實驗對照組：自體脂肪移植后，微滲透泵持續(xù)恒量灌注2000μl生理鹽水；③實驗組：自體脂肪移植，微滲透泵持續(xù)恒量

3、灌注含1μgVEGF的生理鹽水溶液20001μl。不同時間段取出脂肪移植體，用微刻度試管測量移植體剩余的體積；HE染色后光鏡下觀察移植體組織細胞形態(tài)學(xué)改變；免疫組化法觀察實驗組和各對照組脂肪移植體血管生長情況，參照Weidner計數(shù)方法計算出每mlil<'2>面積內(nèi)微血管的量即血管密度，并求其均值。結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理，分析通過應(yīng)用微滲透泵緩釋藥劑的情況下，局部應(yīng)用VEGF對脂肪移植體血管形成、組織成活率的影響，并探討其可能的機制。

4、 【結(jié)果】 1．光鏡下移植體形態(tài)比較各組移植體病理切片組織學(xué)特征相似：移植體外周為纖維包膜；中心為大片壞死的脂肪細胞；二者之間結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要為膠原纖維和囊樣空泡，兩者間可見壞死、趨于壞死以及散在的健康的脂肪細胞分布，健康脂肪細胞周圍常有小血管穿過。手術(shù)對照組及實驗對照組移植體纖維化明顯，脂肪組織存活量少，中央部可見較大區(qū)域壞死灶，移植體內(nèi)有大量淋巴細胞浸潤；實驗組移植脂肪組織存活量大，存活的脂肪細胞大小均一，纖維組織間隔少，部

5、分區(qū)域淋巴細胞浸潤。在各個時間段，不論移植體邊緣還是移植體中央部，實驗組血管較手術(shù)對照組及實驗對照組血管為密集。 2．各時間段血管的密度比較實驗組移植體外周和中央部均可見較多新生血管形成，外周為新生血管形成的“熱點”；手術(shù)對照組及實驗對照組新生血管數(shù)量較少，主要集中在移植體外周。實驗組移植體新生血管密度高于手術(shù)對照組及實驗對照組(P<0.05)；手術(shù)對照組與實驗對照組間新生血管密度差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 3．

6、免疫組化法觀察移植體微血管的生長情況對不同時間段脂肪移植體微血管進行定量研究顯示，各組血管密度先逐漸增高，其后稍微下降。實驗組于14天達最高，手術(shù)對照組和實驗對照組于28天達最高。在同一時間段，實驗組脂肪移植體新生血管密度均高于手術(shù)對照組和實驗對照組。 4．移植體存活情況術(shù)后第7天，各組脂肪移植體存活體積無差別(P>0.05)。術(shù)后14天以后，實驗組移植體脂肪組織存活體積高于手術(shù)對照組及實驗對照組(P<0.05)；手術(shù)對照組與實

7、驗對照組脂肪組織存活體積差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 【結(jié)論】 1．本實驗結(jié)果支持1956年由Peer提出的細胞存活理論，移植體的組織成活與移植體血液循環(huán)重建密切相關(guān)。 2．VEGF 可以促進移植體血管形成，并顯著提高移植體成活率。VEGF的有效劑量取決于移植脂肪的組織量，1ml脂肪顆粒中通過微滲透泵緩釋 1μgVEGF，可以起到有效作用。 3．VEGF提高脂肪移植成活率的可能機制主要包括：潛在的血