光催化劑TiO-,2-對晶狀體上皮細胞生長及殺傷作用的實驗研究.pdf

1、目的研究光催化劑TiO2對牛晶狀體上皮細胞生長的影響以及經(jīng)長波紫外線(UVA)激發(fā)后Ti02對細胞的殺傷作用和機制。探討光催化劑TiO2應(yīng)用于防治后發(fā)性白內(nèi)障的可能性。 方法不同濃度的TiO2與牛晶狀體上皮細胞共同培養(yǎng)，采用噻唑藍(MTT)比色法和流式細胞技術(shù)(FCM)測定細胞生長狀況和細胞生長周期。采用MTT比色法、臺盼藍拒染法、吖啶橙／溴化乙啶(A0／朗)染色法、DNA瓊脂糖凝膠電泳以及電鏡技術(shù)觀察經(jīng)UVA激發(fā)的TiO2對牛

2、晶狀體上皮細胞的殺傷狀況和形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果不同濃度的TiO2與牛晶狀體上皮細胞共同培養(yǎng)后，Ti02顆粒通過細胞吞噬作用進入胞質(zhì)中；牛晶狀體上皮細胞生長速度隨著Ti02濃度升高而下降，200ug向1TiO2組作用48h生長抑制作用最大，此時細胞生長周期示增殖指數(shù)下降，與對照組相比有顯著性差異(P=0.001)；在WA激發(fā)下TiO2對牛晶狀體上皮細胞殺傷率隨著TiO2濃度增加和激發(fā)時間延長而增加，MTT比色法測定只有TiO2作用濃

3、度達到150ug/ml且激發(fā)時間超過30min或濃度達到200ug/ml，其殺傷作用與對照組相比才有顯著性差異(160ug／mlTiO2組激發(fā)30min，40min及200ug/mlTiO2組激發(fā)20min，30min，40min與對照組比較的P值分別為0.00l，0.003，0.007，0.00l和0．0∞)；進一步用臺盼藍拒染法和A0／明染色法證實200ug／mlTiO2組照射30min以上殺傷作用與對照組相比有顯著性差異(P值均為

4、0.000)；200ug/mlTiO2組照射30min以上提取DNA進行瓊脂糖凝膠電泳顯示樣品電泳遷移速率大于對照組，在電鏡下觀察到大量細胞有壞死超微結(jié)構(gòu)改變。 結(jié)論光催化劑TiO2可以抑制體外牛晶狀體上皮細胞正常生長。在UVA的激發(fā)下TiO2可以明顯殺傷牛晶狀體上皮細胞，殺傷效應(yīng)具有時效和量效關(guān)系。其機理可能是：TiO2通過影響細胞周期導(dǎo)致細胞生長抑制。經(jīng)UVA激發(fā)后在晶狀體上皮細胞表面和細胞漿中產(chǎn)生活性氧物質(zhì)氧化細胞膜使其破