濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型的建立與研究.pdf

1、通過探討不同時(shí)間內(nèi)因濕熱造模方法對模型大鼠胃動(dòng)素(Motilin,MTL)、胃泌素(Gastrin,GAS)的影響,找出合適的內(nèi)因濕熱造模時(shí)間:比較和探討不同方法介導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)動(dòng)物模型的效果,找出合適的UC造模方法,在此基礎(chǔ)上構(gòu)建與人體最接近的濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型,并探討該模型的客觀指標(biāo)評價(jià)體系。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)一:SD大鼠分為正常組、模型Ⅰ組(10d)、

2、模型Ⅱ組(20d),模型Ⅲ組(30d):采用灌服豬油、白酒并自由飲用蜂蜜水的方法,造成大鼠濕熱體質(zhì);運(yùn)用放免法觀察MTL、GAS的變化。實(shí)驗(yàn)二:SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組(A)、TNBS/乙醇組(B)、單純免疫組(C)、免疫+福爾馬林組(D)和免疫+TNBS組(E)。分別于造模后第1天、第2周、第4周、第8周處死大鼠,比較造模后各組大鼠的癥狀、體征、病理改變、結(jié)腸粘膜損傷積分及用免疫組化方法檢測COX-2、IFN-γ、VCAM-1。實(shí)驗(yàn)

3、三:結(jié)合實(shí)驗(yàn)一、二的方法誘發(fā)濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎,觀察大鼠證候?qū)W、結(jié)腸病理學(xué)及免疫學(xué)指標(biāo)的改變,判定造模是否成功。
　　 結(jié)果：
　　 實(shí)驗(yàn)一:造模大鼠出現(xiàn)粘液便、懶動(dòng)、食欲減退等濕熱證候,模型Ⅱ組、Ⅲ組MTL、GAS水平均顯著升高(P＜O.01),模型Ⅰ組與對照組比較無顯著性差異(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)二:造模后第1天各種造模方法的模型大鼠病理切片可見結(jié)腸粘膜出現(xiàn)明顯潰瘍,體重下降疾病活動(dòng)度(DAI)、病理學(xué)評分比空白組高

4、(P＜0.05);免疫學(xué)指標(biāo)結(jié)腸組織COX-2、IFN-γ、VCAM-1較正常對照組均升高(P＜0.05或P＜O.01)。但以免疫+TNBS組病變最明顯,持續(xù)時(shí)間最長,至造模后第8周各項(xiàng)指標(biāo)與其他組比較仍有差異(P＜O.05或P＜O.01)。實(shí)驗(yàn)三:模型組大鼠出現(xiàn)嗜睡懶動(dòng)、蜷縮,飲少納呆,精神萎靡,毛發(fā)疏松粗糙、晦暗無光澤,腹瀉及血便明顯。DAI、病理學(xué)評分、MTL、GAS、COX-2、IFN-γ、VCAM-1均升高(P＜0.05或P＜

5、0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 胃動(dòng)素、胃泌素指標(biāo)異常所產(chǎn)生的病理生理效應(yīng),會(huì)出現(xiàn)腹脹、納呆、大便溏、嘔惡等。高脂高糖飲食和白酒灌服20天是脾胃濕熱證病理模型內(nèi)因造模中較合適的時(shí)間。免疫+TNBS組病變更類似人UC,持續(xù)時(shí)間長,是較理想的造模方法。COX-2、IFN-γ、VCAM-1在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病過程中起到了重要作用,該三項(xiàng)指標(biāo)的測定可間接反應(yīng)結(jié)腸組織的炎癥程度。因此采用高脂高糖辛辣飲食加免疫復(fù)合法可以構(gòu)建出理想的