bcl-2、一氧化氮及肝功能在梗阻性黃疸不同時間段實驗研究.pdf

1、目的： 通過建立大鼠梗阻性黃疸模型，研究梗阻性黃疸時在不同時間段內血清NO含量、bcl-2、肝功能以及肝臟病理變化的相互影響，并進一步探討其對梗阻性黃疸肝細胞凋亡影響的機制。 方法： Wistar大鼠，隨機將大鼠分為(1)正常對照組；(2)梗阻性黃疸組：梗阻性黃疸2、4、6、8和10天組：每組9只大鼠。用20％烏拉坦注射液麻醉后，經(jīng)上腹部正中切口將膽總管雙重結扎，術后自由進食水。 大鼠觀察指標：

2、1、一般情況觀察：包括動物精神狀態(tài)、毛色、飲食狀況及開腹所見。 2、下腔靜脈抽血采用多道全自動生化分析儀檢測血清中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBil)、直接膽紅素(Dbil)、總膽汁酸(TBA)堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉肽酶(GGT)。 3、采用硝酸還原酶法測定血清一氧化氮(NO)。 4、肝組織HE染色后光鏡下觀察肝臟的病理改變。 5、肝組織bcl-2蛋白測定，用免疫

3、組化法測定。 結果： 1、正常對照組大鼠行動敏捷，對疼痛刺激反應靈敏、皮膚、尿液顏色無改變；腹腔無腹水，肝臟顏色鮮紅；肝細胞無腫脹、壞死，肝細胞索排列整齊，膽總管呈直徑約0.1cm。梗阻性黃疸組：各組大鼠均有不同程度的行動遲緩、對疼痛刺激反應遲鈍，皮膚、尿液呈黃色；肝臟呈程度不等的瘀膽狀，表面無光澤，結扎處近肝側膽總管呈直徑約0.3cm-0.6cm不等的擴張；細胞呈不同程度腫脹，肝內小膽管擴張。 2、血清中NO、

4、ALT、AST、Tbil、Dbil、TBA、ALP、GGT含量在梗阻性黃疸組各個時相均明顯高于對照組，并且隨著梗阻時間延長含量逐漸增高。 3、肝組織中bcl-2表達在梗阻性黃疸組各個時相均明顯高于對照組，主于匯管處表達。 結論： 1、bcl-2表達明顯升高，這種升高與凋亡細胞數(shù)目的變化時間上存在一致性，表明bcl-2的變化對梗阻性黃疸后肝細胞凋亡起著重要作用。 2、隨著梗阻時間的延長血清NO、ALT、AS

5、T、Tbil、Dbil、TBA、ALP、GGT值增高，表明梗阻性黃疸時肝功明顯受損，梗阻后產(chǎn)生的NO可減少肝酶的釋放，對肝細胞凋亡起著重要作用。 3、肝細胞病理改變肝細胞呈不同程度腫脹，肝內小膽管擴張，隨梗阻性黃疸時間的延長肝細胞凋亡的增加而增加。 4、梗阻性黃疸時肝細胞凋亡和NO濃度變化在時間上存在一定關系，隨著一氧化氮濃度升高，細胞凋亡數(shù)目減少，同時bcl-2表達也升高，NO通過增加肝組織bcl-2蛋白表達而抑制梗阻