玉米胚芽油增強免疫力及輔助降血脂功能的實驗研究.pdf

1、目的：進一步探討玉米胚芽油增強免疫力、輔助降低血脂的功能性作用及其安全性，為新型玉米胚芽油的開發(fā)及帶動其在藥品、食品、保健品等相關行業(yè)的發(fā)展提供可靠的理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1毒理學實驗
　　 (1)小鼠急性毒性實驗體重18～22g的小鼠20只，雌雄各半，按20ml/kg·bw灌胃2次，染毒總劑量為20.0g/kg·bw，連續(xù)觀察14d，記錄小鼠的中毒表現(xiàn)及死亡情況。
　　 (2)遺傳毒性實驗①沙

2、門氏菌回復突變試驗（Ames試驗）實驗菌株為經鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏菌組氨基酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102，體外活化系統(tǒng)為多氯聯(lián)苯誘導的大鼠肝勻漿制備的S-9混合液。根據(jù)毒性測定的結果，設立8、40、200、1000、5000μg/皿5個劑量，同時設立溶劑對照組、陽性對照組和自發(fā)回變組。實驗按照平板摻入法在加S-9與不加S-9混合液的條件下進行，每個組別設3個平皿。若受試物的回變菌落數(shù)為自發(fā)回變菌落數(shù)的2倍以上，

3、并具有劑量-反應關系則判定為陽性。②小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核實驗體重25～30g的小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組：正常對照組（花生油）、陽性對照組(環(huán)磷酰胺，40mg/kg·bw)、3個實驗組的染毒劑量分別為2.5、5.0、10.0g/kg·bw。各組灌胃量均為15ml/kg·bw，灌胃共2次，間隔24h。末次給予受試物6h后處死小鼠，常規(guī)制片。每只小鼠鏡檢1000個嗜多染紅細胞(PCE)，記錄微核細胞數(shù)，計算微核率（即微核細胞數(shù)/

4、嗜多染紅細胞，以千分率表示）。同時觀察200個PCE，計算觀察到的正染紅細胞(NCE)數(shù)目，并計算PCE/NCE比值。③小鼠精子畸形實驗體重27～31g的雄性小鼠25只，分組及操作方法同②，每天灌胃1次，連續(xù)5d。第35d處死小鼠，常規(guī)制片。每只小鼠計數(shù)1000個結構完整的精子，并記錄畸變類型和數(shù)量，計算精子畸形率（以百分率表示）。
　　 (3)大鼠30d喂養(yǎng)實驗體重70～90g的斷乳大鼠80只，雌雄各半，隨機分為花生油正常對照

5、組及玉米胚芽油高、中、低劑量組(20、10、5ml/kg·bw)，各組灌胃量均為20ml/kg·bw，每天灌胃1次，連續(xù)30d。第30d尾靜脈取血，測血常規(guī)；之后禁食16h，腹動脈取血，進行血生化測定。同時對臟器進行病理檢查。
　　 2增強免疫力實驗
　　 將192只雌性KM小鼠隨機分為4個免疫組，每個免疫組的48只小鼠再均分為正常對照組、玉米胚芽油低、中、高劑量組，正常對照組給予花生油，各實驗組分別給予1.67、3.3

6、3、10.00ml/kg·bw的玉米胚芽油，連續(xù)灌胃30d，測定各項免疫指標。
　　 3輔助降血脂實驗
　　 3.1動物實驗
　　 將60只健康成年雄性SD種大鼠，根據(jù)血脂水平隨機分為正常對照組、高脂模型組、陽性對照組、玉米胚芽油低、中、高劑量組(1.67、3.33、10.00ml/kg·bw組)，正常對照組給予正常飼料；高脂模型組給予高脂飼料和花生油；陽性對照組給予高脂飼料喂養(yǎng)的同時灌胃0.05g/kg·bw的

7、非諾貝特溶液；其他3個實驗組在給予高脂飼料喂養(yǎng)的同時灌胃不同劑量的玉米胚芽油，35d后觀察大鼠血脂水平變化。
　　 3.2人群實驗
　　 (1)人體試食實驗將符合單純高血脂等要求的108名自愿參加并簽署知情同意書的志愿者確定為實驗對象，隨機分為實驗組(56人)和對照組(52人)，實驗組采用玉米胚芽油代替午餐、晚餐烹調用油（每餐10ml）；對照組不進行任何干預，所有受試者在實驗期間均保持正常的飲食和生活習慣。45d后對所有

8、實驗對象進行體檢，并檢測各項觀察指標。
　　 (2)問卷調查膳食調查采用24h回顧法，詢問并記錄近3d的膳食攝入情況；飲食及生活習慣調查，采用自行設計的調查問卷，由經過統(tǒng)一培訓的調查員進行現(xiàn)場調查，了解實驗者的基本信息、飲食行為和生活方式等。
　　 結果：
　　 1毒理學實驗
　　 (1)急性毒性實驗14d內動物無中毒表現(xiàn)，且無死亡。該受試物對兩種性別小鼠的MTD均大于20.0g/kg·bw。根據(jù)急性毒性

9、分級標準，該樣品屬無毒級物質。
　　 (2)遺傳毒性實驗①Ames試驗兩次實驗中受試物各劑量組回變菌落數(shù)均未超過自發(fā)回變菌落數(shù)的2倍，亦無劑量-反應關系，說明在加與不加S-9時該樣品對鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株實驗菌株均未呈現(xiàn)遺傳毒性。②小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核實驗與正常對照組比較，各實驗組微核率無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；陽性對照組有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。說明該樣品對小鼠骨髓嗜多染紅細

10、胞微核無致突變作用。③小鼠精子畸形實驗與正常對照組比較，各實驗組小鼠精子畸形率無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；陽性對照組有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。說明該樣品對小鼠精子無致畸作用。
　　 (3)大鼠30d喂養(yǎng)實驗各實驗組大鼠的胃、腸、肝、腎、脾和卵巢/睪丸組織未見明顯異常。組織學檢查，對照組和高劑量組有少數(shù)組織標本出現(xiàn)病理學改變，但程度較輕且無組間分布差異，考慮與動物質量有關，不能說明實驗組出現(xiàn)有意義的病理學改變。
　　

11、 2增強免疫力實驗與正常對照組比較，玉米胚芽油低、高劑量組小鼠的足跖腫脹度均高于正常對照組（P＜0.05，P＜0.01）；低、中、高劑量組小鼠抗體生成細胞數(shù)、腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力均高于正常對照組（P＜0.01）；高劑量組的小鼠單核-巨噬細胞碳廓清能力高于正常對照組(P＜0.01);中、高劑量組小鼠的NK細胞活性均高于正常對照組(P＜0.01，P＜0.05)。
　　 3輔助降血脂實驗
　　 3.1動物實驗
　

12、　 實驗過程中，各組動物生長、活動正常，與正常對照組比較，各組動物的體重差異沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。與高脂模型組比較，陽性對照組和低、中、高劑量組大鼠TC、TG水平均低于高脂模型組（P＜0.01）；HDL-C水平均高于高脂模型組(P<0.01)。與高脂模型組比較，陽性對照組、低、中、高劑量組的血清TC下降百分率分別為18.77％、10.77％、16.92％、17.54％，血清TG下降百分率分別為27.54％、9.84％、14.

13、10％、22.62％，血清HDL-C上升值分別為0.66、0.28、0.34、0.38mmol/L。
　　 3.2人群實驗
　　 (1)人體試食實驗實驗期間受試者的精神狀態(tài)、飲食、睡眠、大小便情況等均未見異常。試驗前后血常規(guī)、血生化指標和肝、腎功能各項檢測指標均在正常值范圍內。自身及與對照組比較，實驗組實驗后血清TC降低百分率分別為14.41％、14.407％，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；TG降低百分率分別為26

14、.50％、37.61％，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。實驗組血清TC、TG有效率分別為69.64％、58.93％，總有效率為64.29％，明顯高于正常對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。HDL-C上升值由高到低依次是實驗組、正常對照組，分別為0.07mmol/L、0.05mmol/L，但是組間差異沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　 (2)問卷調查①一般情況：文化程度比例最高的為本科(31％)；職業(yè)以專業(yè)技術人員

15、比例最大(53％)；家庭月收入多集中在2500-5000元。實驗組與對照組比較，文化程度分布、職業(yè)分布、家庭月收入、每月飲食開支及體重指數(shù)的差異沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；BMI的最小值為16.73，最大值為36.73，均值為25.50±36.22;偏瘦的占2％，超重的占43％，肥胖的占12％。②生活習慣：81.9％的人認為自己的生活比較規(guī)律；76.0％的人的平均睡眠時間在5-8小時之間；81.9％的人認為自己的睡眠有規(guī)律；54.5

16、％的人幾乎不服用保健品。③膳食營養(yǎng)狀況：每天都吃早飯的比例為71.6％；每天能定量進餐的人群為76.2％；82.9％的人沒有挑食偏食的習慣；50.4％的人有暴飲暴食的習慣。與膳食寶塔比較，油、鹽的人均攝入量分別為32.71g、8.02g，均高于推薦的攝入量：蔬菜類、水果類、魚蝦類、奶及奶產品的人均攝入量分別為243.83g、107g、25.95g、36.11g，均低于推薦的攝入量；喝酒的人群占71.23％;飲茶的人群占50.93％;喝咖

17、啡、軟飲料的比例較小。能量人均攝入量為2037.66kcal;碳水化合物、脂肪、蛋白質的供熱比分別為60.84％、23.69％、16.37;與RNI/AI相比，營養(yǎng)素Mg、Zn、Ca、Se、Cr、VA、VB1、VB2、vE等的攝入水平偏低；營養(yǎng)素Fe的攝入水平稍高，為19.5mg/d;④膳食營養(yǎng)與生活習慣對TG影響：兩餐間隔時間越短、經常吃零食、BMI值越大、經常暴飲暴食的人群，TG水平比較高。
　　 結論：
　　 1毒

18、理實驗結果顯示，各指標均在正常范圍內，表明該玉米胚芽油是安全的。
　　 2玉米胚芽油能提高小鼠的足跖腫脹度、NK細胞活性、抗體生成細胞數(shù)、單核-巨噬細胞碳廓清能力，增強小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬能力；根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》判定標準，玉米胚芽油具有增強免疫力的作用。
　　 3不同劑量的玉米胚芽油，均能降低大鼠的TC、TG水平和升高大鼠的HDL-C水平。玉米胚芽油能降低高血脂人群的TC、TG水平、能升高HDL-C水平

19、，根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》判定標準，玉米胚芽油有輔助降血脂功能。
　　 4問卷調查結果顯示，高血脂人群的BMI指數(shù)普遍偏高，飲酒較普遍；油、鹽的人均攝入量均高于推薦的攝入量；蔬菜類、水果類、魚蝦類、奶及奶產品的人均攝入量均低于推薦的攝入量。營養(yǎng)素Mg、Zn、Ca、Se、Cr、VA、VB1、VB2、VE等的攝入水平偏低，營養(yǎng)素Fe的水平稍高。兩餐間隔時間越短、經常吃零食、BMI值越大、經常暴飲暴食的人群，TG水平比較高。