平貝母無性快繁體系的建立及激素自養(yǎng)型培養(yǎng)物形態(tài)發(fā)生機制的研究.pdf

1、本實驗以平貝母為供試材料，篩選出最優(yōu)外植體和培養(yǎng)基質(zhì)，建立了平貝母的高效再生體系，探討了激素自養(yǎng)型培養(yǎng)物生理生化指標(biāo)與形態(tài)發(fā)生的關(guān)系，還探討了不同離體保存方法與細胞存活率和長勢的關(guān)系，并進行了細胞形態(tài)學(xué)觀察，確定了細胞分化的類型，為進一步研究形態(tài)發(fā)生控制和工廠化生產(chǎn)鱗莖奠定了基礎(chǔ)。 平貝母鱗莖和莖段誘導(dǎo)不定芽叢的最佳基質(zhì)為MS+NAA0.5mg/L+BA1.5mg/L，二者誘導(dǎo)愈傷組織的最佳基質(zhì)分別為MS+2.4-D2.0mg/

2、L和MS+2.4-D1.5mg/L，pH=6.0，光培養(yǎng)。對休眠鱗莖進行GA500mg/L的處理可打破休眠，再生植株的周期為40-50天。將平貝母培養(yǎng)物先減半原激素濃度，再以無激素MS基本基質(zhì)繼代培養(yǎng)10余月，可獲得激素自養(yǎng)型培養(yǎng)物。器官發(fā)生過程中從愈傷組織到不定芽再到再生植株，游離氨基酸的含量先升高再下降，而可溶性糖含量是先下降再升高，其中不定芽叢中游離氨基酸含量最高為10.90﹪，愈傷組織中可溶性總糖的含量最高為6.49﹪；不定芽叢

3、中的淀粉酶活力較高，并且?guī)追N培養(yǎng)物中以α-淀粉酶變化趨勢與總淀粉酶變化趨勢相似，其變化幅度也高于β-淀粉酶；過氧化物同工酶以不定芽的酶帶帶數(shù)最多，這說明不定芽中酶的種類最多，含量也較高。在培養(yǎng)物發(fā)育時期各種酶的活性和功能均不相同，可見發(fā)育是一個復(fù)雜的各種功能元件相互協(xié)調(diào)配合的過程。 平貝母培養(yǎng)物有著和生藥相同的生物堿斑點。其中不定根中的總生物堿含量高于愈傷組織和不定芽叢。 通過超低溫的方法可以達到中長期保存平貝母種質(zhì)資源