林蔭銀蓮花組培快繁體系的建立和形態(tài)發(fā)生的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、林蔭銀蓮花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)屬銀蓮花屬(Anemone)植物,其干燥根莖又名地烏。可入藥,具有祛風濕、助筋骨、消腫止痛等功效。本研究應用組織培養(yǎng)技術首次建立了林蔭銀蓮花快速繁殖技術體系,并對其愈傷組織的誘導和形態(tài)發(fā)生過程進行了細胞組織學鑒定,為林蔭銀蓮花的組織培養(yǎng)技術應用于生產提供可行技術。主要研究結果如下:
   (1)1.5%的多菌靈浸泡2 h,可有效預防真菌污染;以0.2%的HgCl

2、2消毒9 min能夠有效控制污染,且對外植體傷害?。辉谂囵B(yǎng)基中添加300 mg/L頭孢噻肟鈉,對污染的控制效果達到顯著水平,且對外植體的生長無明顯抑制作用;
   (2)1/2芽為外植體誘導率最高,未展開葉片的誘導率比展開葉片誘導率高;葉柄只有極少數可在基部產生愈傷組織,但培養(yǎng)兩個月后死亡。確定以根狀莖萌發(fā)的健康芽為最佳外植體。
   (3)細胞分裂素類物質6-BA與生長素類組合的愈傷誘導效果比ZT與生長素組合的效果好;

3、生長素類物質NAA與6-BA組合的愈傷誘導效果比IBA與6-BA組合的效果好;6-BA和ZT二者與生長素組合,誘導率反而下降。
   (4)不同激素配比對林蔭銀蓮花的器官分化影響顯著。培養(yǎng)基中單獨添加6-BA,只誘導產生不定芽;R4(0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L6-BA)和R5(0.2 mg/LNAA+2.0 mg/L6-BA)培養(yǎng)基上誘導產生不定芽的同時也誘導產生了擬球莖,以R5擬球莖誘導率最高;當生長素NAA增

4、加到0.5 mg/L時,R6(0.5 mg/L NAA+1.0mg/L6-BA)和R7(0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L6-BA)中,不定芽和擬球莖的誘導率均沒有提高,反而有下降的趨勢;當生長素NAA濃度增加到1 mg/L時,R8(1 mg/L NAA+1.0mg/L6-BA)已經沒有擬球莖產生,R8和R9(1 mg/LNAA+2.0mg/L6-BA)只有少量的不定芽產生;R10的誘導率極低,偶有少量擬球莖產生。
  

5、 (5)不同的基本培養(yǎng)基對外植體生長影響明顯。在MS培養(yǎng)基上外植體長勢好;其次是B5培養(yǎng)基;White、Nitsch培養(yǎng)基效果較差。不同基本培養(yǎng)基上,外植體褐化情況也不同。外植體在MS、B5培養(yǎng)基上褐化較少,而在White、Nitsch、N6上褐化較嚴重。
   (6)不定芽及擬球莖生根誘導培養(yǎng),以5℃為適宜的溫度條件,即使沒有添加激素,仍有較高的生根率和單芽生根數;在18℃條件下,生根率和單芽生根數都降低。1/2MS培養(yǎng)基中添

6、加0.2 mg/L NAA,生根率和單芽生根數達到最大,但是根較細;1/2MS培養(yǎng)基中添加0.5 mf/L IBA的處理,單芽生根數較少,但是根較粗。
   (7)在培養(yǎng)基Ⅰ(MS+2.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA)和培養(yǎng)基Ⅱ(MS+2.0mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA)上培養(yǎng)的材料,每4天取一次材料,觀察愈傷組織誘導和形態(tài)發(fā)生情況。24 d后,培養(yǎng)基Ⅰ開始誘導產生紫色愈傷組織,培養(yǎng)基Ⅱ中培養(yǎng)28

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