肝陽(yáng)上亢證高血壓動(dòng)物模型的優(yōu)化與方證相應(yīng)的初步探討.pdf

1、目的:為開(kāi)展“方證相應(yīng)”的系統(tǒng)研究，進(jìn)行肝陽(yáng)上亢證高血壓動(dòng)物模型的優(yōu)化，制成合適的肝陽(yáng)上亢證高血壓動(dòng)物模型；以天麻鉤藤飲為例，探討平肝潛陽(yáng)方與高血壓肝陽(yáng)上亢證之間的方證相應(yīng)性。
　　方法:①建立肝陽(yáng)上亢證模型的條件篩選研究比較單味中藥（附子、肉桂、辣椒）及復(fù)方（由附子、肉桂、干姜三味組成）對(duì)小鼠體征及行為學(xué)、生理生化等指標(biāo)的影響，并結(jié)合臨床中醫(yī)證候，優(yōu)選肝陽(yáng)上亢造模條件。ICR雄性小鼠50只分為正常組、附子組、肉桂組、復(fù)方組和辣椒

2、組。每天定時(shí)測(cè)定小鼠體重、進(jìn)食量、飲水量；于實(shí)驗(yàn)7d、14d、21d、28d時(shí)測(cè)各組小鼠體溫、面部溫度、抓力、游泳時(shí)間、自主活動(dòng)；末次給藥后對(duì)小鼠的肝組織SOD活力、血清TC、TG、HDL-C、NO含量進(jìn)行測(cè)定。②天麻鉤藤飲與小鼠肝陽(yáng)上亢證的方證相應(yīng)研究以第一部分優(yōu)選出的復(fù)方/辣椒模型為觀察對(duì)象，觀察潛陽(yáng)方（天麻鉤藤飲）與滋陰方（六味地黃丸）對(duì)模型相應(yīng)指標(biāo)的不同影響。以天麻鉤藤飲與肝陽(yáng)上亢證的方證相應(yīng)性進(jìn)一步確定肝陽(yáng)上亢造模條件。ICR

3、雄性小鼠82只，分為正常組、復(fù)方附桂姜湯模型組、復(fù)方附桂姜湯模型+潛陽(yáng)方組、復(fù)方附桂姜湯模型+滋陰方組，辣椒模型組、辣椒模型+潛陽(yáng)方組、辣椒模型+滋陰方組，正常組10只，其余各組12只。測(cè)定小鼠體重、進(jìn)食量、飲水量；于實(shí)驗(yàn)7d、14d、21d、28d時(shí)測(cè)面部溫度、肛溫、抓力、自主活動(dòng)；末次給藥后對(duì)小鼠的肝組織SOD、GSH-PX酶活力，肝組織MDA含量，血清NO含量進(jìn)行測(cè)定。③天麻鉤藤飲與SHR大鼠肝陽(yáng)上亢證的方證相應(yīng)研究以 SHR大鼠

4、加灌復(fù)方附桂姜湯制備高血壓肝陽(yáng)上亢大鼠模型，觀察潛陽(yáng)方（天麻鉤藤飲）與滋陰方（六味地黃丸）的不同影響，對(duì)方證相應(yīng)性進(jìn)行初步探討。SHR雄性大鼠44只，分為正常組、模型組、滋陰組、潛陽(yáng)組，每組11只。測(cè)定大鼠體重、進(jìn)食量、飲水量，于實(shí)驗(yàn)7d、14d、21d、28d時(shí)測(cè)面部溫度、眩暈、血壓、抓力、自主活動(dòng)末次給藥后測(cè)高血壓相關(guān)若干指標(biāo)。
　　結(jié)果:①溫燥藥可使小鼠在體征和行為方面產(chǎn)生變化。傳統(tǒng)單味中藥附子、肉桂、辣椒中，辣椒對(duì)小鼠的影

5、響更顯著。辣椒組小鼠表現(xiàn)出自主活動(dòng)次數(shù)持續(xù)增加， 面部溫度升高的現(xiàn)象。單味中藥附子、肉桂對(duì)小鼠的影響不及由附子、肉桂和干姜三味中藥組成的復(fù)方顯著。復(fù)方附桂姜湯組在面部溫度、自主活動(dòng)、游泳時(shí)間等方面引起的變化更為明顯。復(fù)方附桂姜湯能使小鼠肝組織SOD酶活力、血清NO含量降低，推測(cè)是其持續(xù)性引起小鼠自主活動(dòng)次數(shù)增加、面部溫度升高、游泳時(shí)間縮短的機(jī)制之一。②天麻鉤藤飲能明顯改善復(fù)方附桂姜湯模型小鼠指標(biāo)的異常，但對(duì)辣椒模型的作用不顯著

6、，故選定復(fù)方附桂姜湯模型為肝陽(yáng)上亢模型。復(fù)方附桂姜湯模型組可引起小鼠面部溫度升高、自主活動(dòng)次數(shù)增加，與肝陽(yáng)上亢證面部烘熱、煩躁的癥狀相符，肝組織抗氧化功能的SOD、GSH-PX酶活力降低是其發(fā)揮作用的機(jī)制之一。六味地黃丸初期可通過(guò)滋補(bǔ)腎陰牽制肝陽(yáng)，使肝陽(yáng)上亢癥狀有所減輕，但時(shí)效性較短，究其根源是方不對(duì)證，治標(biāo)不治本。天麻鉤藤飲可明顯緩解肝陽(yáng)上亢模型小鼠體重減輕、面部溫度增高、自主活動(dòng)增加等癥狀，可能與其對(duì)肝陽(yáng)的調(diào)節(jié)作用有關(guān)；天麻鉤藤飲能

7、增加肝組織SOD、GSH酶活力，降低肝組織MDA含量，可能與其對(duì)肝疏泄功能的調(diào)節(jié)有關(guān)；天麻鉤藤飲明顯增加血清NO含量，推測(cè)是天麻鉤藤飲降低血壓機(jī)制之一。天麻鉤藤飲能改善復(fù)方附桂姜湯模型小鼠的肝陽(yáng)上亢癥狀及相關(guān)指標(biāo)，維效時(shí)間較長(zhǎng)，起到了標(biāo)本兼顧的作用。③平肝潛陽(yáng)方（天麻鉤藤飲）對(duì)加灌復(fù)方附桂姜湯的SHR大鼠異常指標(biāo)有顯著性改善作用，確定SHR加灌復(fù)方附桂姜湯模型為高血壓肝陽(yáng)上亢模型。平肝潛陽(yáng)方使大鼠血漿降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）含量顯著

8、性增加，推測(cè)NO-CGRP途徑為天麻鉤藤飲對(duì)治療高血壓的機(jī)制之一。
　　結(jié)論:通過(guò)比較單味溫燥藥（附子、肉桂、辣椒）及復(fù)方附桂姜湯模型，結(jié)果復(fù)方附桂姜湯可使SHR大鼠飲水量增加、血壓顯著升高、眩暈時(shí)間延長(zhǎng)、抓力增強(qiáng)、自主活動(dòng)次數(shù)減少，表現(xiàn)出高血壓肝陽(yáng)上亢證的血壓升高、眩暈、口渴欲飲、煩躁易怒的證侯特征，故復(fù)方附桂姜湯可作為高血壓肝陽(yáng)上亢證的造模條件。以平肝潛陽(yáng)方（天麻鉤藤飲）為例的以方測(cè)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果，揭示出天麻鉤藤飲與高血壓肝陽(yáng)上亢