木霉菌劑防治人參根部病害研究及木霉田間種群動態(tài)監(jiān)測.pdf

1、本文針對人參根部病害主要病原菌銹腐菌(Cylindrocarpondestructans)、立枯病菌(Rhizoctoniasolani)、疫霉(Phythphoracactorum)，對中國科學(xué)院微生物所提供的具有潛在拮抗作用的10株木霉進(jìn)行篩選，并對篩選到的木霉進(jìn)行了部分生物學(xué)特性及抑菌機(jī)制研究、可濕性粉劑研究、田間種群動態(tài)研究及菌劑田間防治人參根部病害研究，實(shí)驗設(shè)置及結(jié)果如下：一、拮抗木霉的篩選研究采用土壤浸液培養(yǎng)基培養(yǎng)法、PDA

2、培養(yǎng)基培養(yǎng)法和平板對峙培養(yǎng)法，對10株木霉進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，綠色木霉(TrichodermaviridePers.)Tv04-2、哈茨木霉(TrichodermaharzianumRifai.)Th3080在兩種培養(yǎng)基上均能良好生長。Tv04-2在土壤浸液培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基上的生長速度分別為1.80±0.01、2.15±0.08cm·d-1；Th3080的生長速度分別為1.63±0.02、2.45±0.01cm·d-1，優(yōu)于其他木霉

3、菌株。 Th3080、Tv04-2的抑菌效果較高。Tv04-2對R.solani、C.destructan、P.cactorum的抑制率分別為76.25％、73.94％、99.54％，Th3080對R.solani、C.destructan、P.cactorum的抑制率分別為67.28％、78.55％、96.19％。 二、綠色木霉Tv04-2與哈茨木霉Th3080部分生物學(xué)特性及主要抑菌機(jī)制研究比較了Tv04-2與Th3

4、080在3種光照條件，8種pH值，4種殺菌劑的5個濃度下的生長情況。結(jié)果表明，純黑暗條件下Tv04-2及Th3080生長快于其他光照條件。Th3080與pH值在4.5～8.0的范圍內(nèi)線性相關(guān)，相關(guān)方程為Y=-0.3707X+4.1432，相關(guān)系數(shù)R2=0.9141。Tv04-2與pH值之間不存在線性相關(guān)，pH值為5.0時生長速度最大。兩種木霉對苗菌敵、百菌清、代森錳鋅三種殺菌劑敏感，對菌蟲絕霸的敏感性較低。Th3080在菌蟲絕霸濃度降到

5、320μg/ml時，完全不受抑制，可快速生長，Tv04-2對菌蟲絕霸完全不敏感。 木霉可對R.solani發(fā)生重寄生作用，對C.destructans與P.cactorum未觀察到重寄生現(xiàn)象的發(fā)生。兩種木霉均可通過產(chǎn)生某種或者某些揮發(fā)性物質(zhì)抑制三種病原真菌的生長。Th3080產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)對C.destructans的抑制作用最強(qiáng)，對P.cactorum最弱，而Tv04-2產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)對R.solani的抑制力最強(qiáng)，對P.

6、cactorum次之。 三、木霉可濕性粉劑及其保存條件研究兩種木霉可濕性粉劑的制備流程為：斜面種子——平板種子——液體種子——固體發(fā)酵培養(yǎng)——烘干——粉碎——添加助劑——檢驗——包裝。其中主要對固體發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行了篩選。Tv04-2的固體發(fā)酵培養(yǎng)基組合為玉米粉40g，麥麩10g，水40％，F(xiàn)eSO4·7H2O10g/kg，光照條件為24h光照(照度為12000Lux)。Th3080的固體培養(yǎng)基為玉米粉40g，麥麩

7、10g，水30％，F(xiàn)eSO4·7H2O0.1g/kg，光照條件為12h光照(照度為12000Lux)12h黑暗交替。兩種木霉的接菌量為每10g固體培養(yǎng)物接1ml孢子含量為108的懸浮液，25℃下透氣培養(yǎng)28d。 木霉的培養(yǎng)基質(zhì)玉米粉和麥麩可直接作為載體。木霉Tv04-2助劑組成為甲基纖維素2‰，司本20≤0.1％。木霉Th3080助劑組成為糊精5‰，司本20≤0.01％。 長時間高溫、光照和潮濕是導(dǎo)致分生孢子死亡的主要原

8、因，保存時應(yīng)加以避免，4℃、遮光、密封是最佳保存條件。 四、木霉田間種群動態(tài)研究及回收毒力測定木霉田間種群動態(tài)研究設(shè)3組實(shí)驗，包括Tv04-2(A)、Th3080(B)及兩者混合(AB)。各組下設(shè)5種處理：8g·m-2、16g·m-2、24g·m-2、16g·m-2+幾丁質(zhì)1g·m-2、16g·m-2+消毒麥麩20g·m-2。結(jié)果表明，各處理種群變化在3處實(shí)驗地不盡相同。在北京藥植所與北京懷柔實(shí)驗地，木霉施入后的前10d種群數(shù)量

9、急劇下降，平均下降到初始投入菌量的10.3％，而在吉林省撫松縣實(shí)驗地，木霉施入后前30d種群數(shù)量除A1、A2外，均呈現(xiàn)明顯的增加趨勢。 150d檢測時各處理的木霉種群數(shù)量與初始投入的木霉數(shù)量的比率均在10％以上，其中B2幾高達(dá)30％以上，這說明木霉施入土壤后可以長期存活。木霉種群動態(tài)與土壤含水量的變化有一定的相關(guān)性。幾丁質(zhì)和麥麩對木霉種群數(shù)量的保持有一定促進(jìn)作用，但效果不顯著。 Tv04-2在人參地土壤中經(jīng)歷4～6個月后

10、，對三種人參病原菌的抑制率與原始菌種相比無顯著變化。Th3080穩(wěn)定性不如Tv04-2，其對人參病原菌的抑制能力有的弱化，有的增強(qiáng)。 五、木霉菌劑田間防治人參根部病害研究設(shè)Tv04-2(A)、Th3080(B)兩組實(shí)驗，蘸根(Z)、浸種(J)、溝施(G)三種使用方法。其中，浸種、蘸根設(shè)置5個濃度：×100、×1000、×5000、×10000、×50000，溝施設(shè)3個濃度：0.1g·m-2、1.0g·m-2、10g·m-2。另設(shè)