煙粉虱田間種群抗藥性監(jiān)測(cè)及BtGluCla1基因組結(jié)構(gòu)的分析.pdf

1、煙粉虱（Bemisia tabaci）已經(jīng)成為世界性的重要害蟲，在棉花和蔬菜生產(chǎn)上造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。煙粉虱的田間藥劑防治已非常困難，為了明確我國(guó)東南沿海地區(qū)煙粉虱田間種群的抗藥性概況并篩選有效藥劑，對(duì)江蘇、廣東和福建的煙粉虱種群進(jìn)行了抗性監(jiān)測(cè)。阿維菌素是防治煙粉虱最高效的藥劑之一，昆蟲谷氨酸受體是阿維菌素的主要作用靶標(biāo)。因此，本研究克隆了煙粉虱谷氨酸受體的全長(zhǎng)cDNA，并對(duì)其基因組結(jié)構(gòu)和RNA可變剪接進(jìn)行了分析。
　　 1.

2、煙粉虱田間種群抗藥性監(jiān)測(cè)
　　 為了明確我國(guó)東南沿海地區(qū)煙粉虱田間種群抗藥性發(fā)展的現(xiàn)狀，對(duì)采自江蘇、廣東和福建省10個(gè)田間種群進(jìn)行了抗藥性監(jiān)測(cè)。監(jiān)測(cè)藥劑包括吡蟲啉、噻蟲嗪、阿維菌素、氟蟲腈、多殺菌素、毒死蜱和高效氯氰菊酯。以室內(nèi)飼養(yǎng)的B型煙粉虱NJ-S作為對(duì)照，江蘇、廣東和福建的煙粉虱種群均對(duì)新煙堿類殺蟲劑產(chǎn)生了中高水平的抗性，其中江蘇鹽城種群對(duì)吡蟲啉和噻蟲嗪的抗性均超過(guò)1000倍；除江蘇鹽城種群對(duì)氟蟲腈具有中等抗性水平（25倍

3、），其他所有檢測(cè)的田間種群對(duì)氟蟲腈、阿維菌素、多殺菌素、毒死蜱和高效氯氰菊酯均為敏感性下降至低水平抗性（<10倍）。以SUD-S敏感品系作為對(duì)照，所有檢測(cè)的田間種群對(duì)毒死蜱和高效氯氰菊酯都具有中高水平的抗性。
　　 2.煙粉虱谷氨酸受體BtGluCla1基因組結(jié)構(gòu)及可變剪接
　　 昆蟲谷氨酸受體門控氯離子通道是阿維菌素的主要作用靶標(biāo)。本文在前期工作的基礎(chǔ)上，根據(jù)煙粉虱谷氨酸受體BtGluCla1基因的cDNA全長(zhǎng)序列，擴(kuò)

4、增獲得其基因組DNA全長(zhǎng)（30 kb）。BtGluCla1基因的編碼區(qū)被10個(gè)內(nèi)含子分隔，最短的是第四個(gè)內(nèi)含子（475 bp），最長(zhǎng)的是第三個(gè)內(nèi)含子（5.8 kb）。對(duì)10個(gè)cDNA全長(zhǎng)進(jìn)行克隆和測(cè)序，獲得了5個(gè)不同的轉(zhuǎn)錄本。通過(guò)對(duì)不同轉(zhuǎn)錄本cDNA序列和基因組DNA序列進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)BtGluCla1基因在第二、第九和第十個(gè)外顯子處存在可變剪接。煙粉虱BtGluCla1通過(guò)可變剪接增加了其表達(dá)產(chǎn)物的多樣性和復(fù)雜性，該研究結(jié)果對(duì)于研究煙