細辛不同配伍對其主要化學成分的影響研究.pdf

1、目的：研究建立細辛及其配伍后揮發(fā)油中主要成分甲基丁香酚的GC-MS含量測定方法及細辛及其不同配伍后其毒性成分馬兜鈴酸的HPLC-UV含量測定法。通過建立細辛主要有效成分及有毒成分的含量測定法并測定其含量，為細辛品質(zhì)評價提供依據(jù)。通過測定細辛配伍前后及不同煎煮時間主要有效成分及有毒成分的含量變化，探討細辛配伍規(guī)律及臨床藥用規(guī)律，為細辛藥材的合理應用及臨床應用的安全有效運用提供實驗基礎及依據(jù)。
　　方法：（1）揮發(fā)油提取法參照《中華人

2、民共和國藥典》2010年版一部附錄XD揮發(fā)油測定法項下規(guī)定的方法，提取細辛及其配伍中藥的揮發(fā)油。氣相色譜分析條件為：HP-5MS彈性石英毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)；載氣He(≥99.9%)；柱流量（1.0ml/min）；進樣口溫度250℃；分流比50∶1；氣化溫度250℃；進樣量1μl；溶劑延遲3.0min；程序升溫記錄：柱溫80℃保持3min，以5℃/m in升至120℃保持3min,再以5℃/m in升至

3、160℃保持5m in。質(zhì)譜條件:電離方式E I(70 eV)；離子源溫度230℃；檢測器溫度280℃；譜庫檢索NIST08；質(zhì)量掃描范圍50 amu～550 amu；四級桿150℃。（2）反相高效液相色譜法測定細辛及其配伍煎煮液中馬兜鈴酸的含量采用有機溶劑萃取法法制備供試品溶液，其色譜分析條件為：色譜柱為Agilent Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流動相為乙腈-

4、0.1%冰乙酸梯度洗脫；流速1.0mL/min；柱溫為25℃；檢測器為紫外檢測器；檢測波長為250nm。
　　結果：（1）本研究建立了細辛及其配伍后揮發(fā)油中主要成分甲基丁香酚的GC-MS含量測定方法及細辛及其不同配伍后其毒性成分馬兜鈴酸的HPLC-UV含量測定法，實驗結果表明，所建立的方法準確快速，重復性好，可用于準確測定細辛及其不同配伍后甲基丁香酚和馬兜鈴酸的含量。（2）本研究結果表明：不同產(chǎn)地細辛揮發(fā)油中的甲基丁香酚含量存在較

5、大差異，其含量在0.1758g/ml～0.3796g/ml范圍內(nèi)。細辛經(jīng)不同配伍后，其有效成分甲基丁香酚均有不同程度變化，其中細辛配伍甘草后毒效比最低。細辛經(jīng)過不同煎煮時間對其揮發(fā)油影響表現(xiàn)為，煎煮時間越長揮發(fā)油損失越大，其中有毒成分黃樟醚含量下降明顯，有效成分甲基丁香酚損失較少。（3）不同產(chǎn)地細辛煎煮液中馬兜鈴酸含量存在較大差異，其含量在0～2.960μg/ml范圍內(nèi)；不同配伍后煎煮液馬兜鈴酸也有較大變化，其中配伍甘草后馬兜鈴酸降低最

6、多。細辛不同煎煮時間對其煎煮液中馬兜鈴酸影響表現(xiàn)為，細辛經(jīng)過長時間煎煮后，馬兜鈴酸下降，煎煮液中毒性下降。
　　結論：本研究建立的用于測定細辛揮發(fā)油中甲基丁香酚含量的GC-MS法和測定細辛中毒性成分馬兜鈴酸含量的HPLC-UV法具有較強的針對性和準確性；研究結果為合理評價細辛品質(zhì)提供了實驗方法和依據(jù)。通過研究細辛配伍前后主要有效成分和有毒成分的含量變化，為細辛藥材的合理應用，揭示其配伍規(guī)律及臨床應用的安全有效提供了實驗基礎及科學依