細(xì)辛不同配伍對(duì)其主要化學(xué)成分的影響研究.pdf

1、目的：研究建立細(xì)辛及其配伍后揮發(fā)油中主要成分甲基丁香酚的GC-MS含量測(cè)定方法及細(xì)辛及其不同配伍后其毒性成分馬兜鈴酸的HPLC-UV含量測(cè)定法。通過(guò)建立細(xì)辛主要有效成分及有毒成分的含量測(cè)定法并測(cè)定其含量，為細(xì)辛品質(zhì)評(píng)價(jià)提供依據(jù)。通過(guò)測(cè)定細(xì)辛配伍前后及不同煎煮時(shí)間主要有效成分及有毒成分的含量變化，探討細(xì)辛配伍規(guī)律及臨床藥用規(guī)律，為細(xì)辛藥材的合理應(yīng)用及臨床應(yīng)用的安全有效運(yùn)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及依據(jù)。
　　方法：（1）揮發(fā)油提取法參照《中華人

2、民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法項(xiàng)下規(guī)定的方法，提取細(xì)辛及其配伍中藥的揮發(fā)油。氣相色譜分析條件為：HP-5MS彈性石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)；載氣He(≥99.9%)；柱流量（1.0ml/min）；進(jìn)樣口溫度250℃；分流比50∶1；氣化溫度250℃；進(jìn)樣量1μl；溶劑延遲3.0min；程序升溫記錄：柱溫80℃保持3min，以5℃/m in升至120℃保持3min,再以5℃/m in升至

3、160℃保持5m in。質(zhì)譜條件:電離方式E I(70 eV)；離子源溫度230℃；檢測(cè)器溫度280℃；譜庫(kù)檢索NIST08；質(zhì)量掃描范圍50 amu～550 amu；四級(jí)桿150℃。（2）反相高效液相色譜法測(cè)定細(xì)辛及其配伍煎煮液中馬兜鈴酸的含量采用有機(jī)溶劑萃取法法制備供試品溶液，其色譜分析條件為：色譜柱為Agilent Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-

4、0.1%冰乙酸梯度洗脫；流速1.0mL/min；柱溫為25℃；檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。
　　結(jié)果：（1）本研究建立了細(xì)辛及其配伍后揮發(fā)油中主要成分甲基丁香酚的GC-MS含量測(cè)定方法及細(xì)辛及其不同配伍后其毒性成分馬兜鈴酸的HPLC-UV含量測(cè)定法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所建立的方法準(zhǔn)確快速，重復(fù)性好，可用于準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)辛及其不同配伍后甲基丁香酚和馬兜鈴酸的含量。（2）本研究結(jié)果表明：不同產(chǎn)地細(xì)辛揮發(fā)油中的甲基丁香酚含量存在較

5、大差異，其含量在0.1758g/ml～0.3796g/ml范圍內(nèi)。細(xì)辛經(jīng)不同配伍后，其有效成分甲基丁香酚均有不同程度變化，其中細(xì)辛配伍甘草后毒效比最低。細(xì)辛經(jīng)過(guò)不同煎煮時(shí)間對(duì)其揮發(fā)油影響表現(xiàn)為，煎煮時(shí)間越長(zhǎng)揮發(fā)油損失越大，其中有毒成分黃樟醚含量下降明顯，有效成分甲基丁香酚損失較少。（3）不同產(chǎn)地細(xì)辛煎煮液中馬兜鈴酸含量存在較大差異，其含量在0～2.960μg/ml范圍內(nèi)；不同配伍后煎煮液馬兜鈴酸也有較大變化，其中配伍甘草后馬兜鈴酸降低最

6、多。細(xì)辛不同煎煮時(shí)間對(duì)其煎煮液中馬兜鈴酸影響表現(xiàn)為，細(xì)辛經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間煎煮后，馬兜鈴酸下降，煎煮液中毒性下降。
　　結(jié)論：本研究建立的用于測(cè)定細(xì)辛揮發(fā)油中甲基丁香酚含量的GC-MS法和測(cè)定細(xì)辛中毒性成分馬兜鈴酸含量的HPLC-UV法具有較強(qiáng)的針對(duì)性和準(zhǔn)確性；研究結(jié)果為合理評(píng)價(jià)細(xì)辛品質(zhì)提供了實(shí)驗(yàn)方法和依據(jù)。通過(guò)研究細(xì)辛配伍前后主要有效成分和有毒成分的含量變化，為細(xì)辛藥材的合理應(yīng)用，揭示其配伍規(guī)律及臨床應(yīng)用的安全有效提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及科學(xué)依