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1、中藥復(fù)方是中醫(yī)治病的主要臨床應(yīng)用形式,復(fù)方中的化學(xué)成分是中藥發(fā)揮藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。進(jìn)行復(fù)方化學(xué)成分和配伍關(guān)系的研究,在闡明中醫(yī)的方藥理論,揭示中藥的配伍規(guī)律和作用機(jī)制,優(yōu)化制劑工藝,制定質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化并走向國(guó)際市場(chǎng)等方面均具重要意義。本課題通過(guò)對(duì)銀翹清肺配方全方配伍前后化學(xué)成分的定性、定量和HPLC圖譜分析,以及不同藥味之間配伍關(guān)系的研究,考察配伍對(duì)本方化學(xué)成分的影響,探討該方配伍應(yīng)用的科學(xué)性,為其配伍機(jī)理的進(jìn)一步深入研究
2、提供基礎(chǔ),并提供一種研究的方法與思路。 在文獻(xiàn)研究的基礎(chǔ)上,采用正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化復(fù)方的提取工藝;采用薄層色譜法對(duì)配伍前后提取液的不同溶劑萃取部分進(jìn)行定性分析;以高效液相法測(cè)定本方配伍前后主要有效成分綠原酸和連翹苷的含量變化,并對(duì)比其HPLC圖譜在配伍前后的差異;通過(guò)不同配伍組的TLC、HPLC鑒別比較,考察各藥味對(duì)有效成分含量的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:1、以綠原酸含量和浸膏得率為指標(biāo),采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝,所得醇提工藝的
3、優(yōu)化條件為:A3D2B3C2,即使用10倍量的70%的乙醇,提取2次,每次提取2小時(shí)。 2、通過(guò)配伍前后提取液的不同溶劑萃取部分的薄層色譜圖的比較,發(fā)現(xiàn)多數(shù)主要成分在配伍后未發(fā)生明顯改變;部分化學(xué)成分的含量在配伍后發(fā)生了較大變化,并與配伍方式有關(guān)。 3、以HPLC法進(jìn)行含量測(cè)定:以方中君藥金銀花、連翹的主要化學(xué)成分綠原酸、連翹苷為定量分析指標(biāo):合煎液中綠原酸含量比單煎混合液低10%左右,而連翹苷含量略低于單煎混合液。
4、 4、HPLC圖譜分析:整體分析合煎液與單煎混合液的峰形峰貌基本一致,十個(gè)共有峰中7個(gè)峰面積基本一致,3個(gè)差異較大。 5、通過(guò)對(duì)合煎與單煎混合這兩種配伍方式的比較研究,認(rèn)為在兩種配伍方式下該藥對(duì)的化學(xué)成分存在一定的差異,主要表現(xiàn)為量的變化。同時(shí),研究了不同藥味之間配伍對(duì)化學(xué)成分的影響,發(fā)現(xiàn)各藥味之間的不同配伍對(duì)復(fù)方中主要有效成分的影響不大。 綜上所述:優(yōu)選的提取工藝,所得的有效成分比較完全,適合生產(chǎn)實(shí)踐;其TLC、H
5、PLC定性定量實(shí)驗(yàn)均具有專(zhuān)屬、穩(wěn)定、重復(fù)性強(qiáng)的特點(diǎn);HPLC圖譜整體分析比較,分析合煎液與單煎混合液的峰形峰貌基本一致;建立起復(fù)方配伍研究的基本方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本方的化學(xué)成分在配伍后發(fā)生了不同程度的變化,部分成分發(fā)生顯著的量的變化。另外,對(duì)合煎與單煎混合這兩種配伍方式的比較研究也為中藥配方顆粒的應(yīng)用與推廣提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù),同時(shí)也提示在制備中藥配方顆粒時(shí)可進(jìn)一步優(yōu)化工藝條件,在體現(xiàn)它的標(biāo)準(zhǔn)化和使用便捷的優(yōu)點(diǎn)的同時(shí)保證其在化學(xué)成分、藥效、臨
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