益婦寧軟膠囊治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的實驗研究.pdf

1、背景與研究目的：絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(PMO)指主要由絕經(jīng)后雌激素水平低落引起的骨質(zhì)疏松癥。PMO的主要病理生理改變是激素水平降低，骨轉(zhuǎn)換增加，導致骨丟失加速。該病的發(fā)病率逐年升高，它的發(fā)病是由體內(nèi)激素、遺傳基因、營養(yǎng)因素、生活習慣等多因素共同作用的；近年研究發(fā)現(xiàn)，其中雌激素水平降低是最重要的原因，而雌激素主要通過雌激素受體(ER)介導發(fā)揮其生物效應(yīng)。ER存在于各種骨細胞中，表明雌激素通過多途徑直接促進成骨細胞的活化和抑制破骨細胞的活性，調(diào)

2、控骨再建周期中的骨質(zhì)形成、骨質(zhì)吸收及骨再建率。目前，ER的兩種亞型在骨中的具體作用機制和相互關(guān)系尚有待于進一步研究。雌激素水平下降還可以間接通過甲狀旁腺激素(PTH)和降鈣素(CT)的變化，或影響骨代謝的局部調(diào)節(jié)因子，導致骨代謝偶聯(lián)失衡，使骨質(zhì)的吸收大于骨質(zhì)的重建，結(jié)果導致骨小梁結(jié)構(gòu)破壞，骨量丟失。對于絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的治療，主要是抗骨質(zhì)吸收，目前美國FDA只批準雌激素替代療法(PRT)用于臨床治療。ERT的治療效果比較確鑿，但由于有很

3、多副作用，該療法備受置疑。既保留雌激素對骨的保護作用，又避免雌激素相關(guān)副作用的理想治療藥物——選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)的研發(fā)是現(xiàn)在研究的熱點。 中醫(yī)學根據(jù)其病因病機和臨床表現(xiàn)，認為該病定性定位較準確的當屬“骨痿”。中醫(yī)認為腎中精虧髓虛，是發(fā)生PMO的實質(zhì)所在，脾虛、肝郁、肝虛和血瘀相互影響，促使骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生。臨床以補腎為主，輔以健脾，疏肝活血的中藥來治療該病，取得了一定療效，但存在很多不足之處，關(guān)于中藥開發(fā)SER

4、Ms也剛剛起步。益婦寧軟膠囊(YFN)以蛤蟆油和莪術(shù)來補腎益精、調(diào)和氣血，攻補兼施，標本同治。前期的臨床及實驗研究均已證實，YFN可以有效改善下丘腦-垂體-性腺軸的激素分泌失調(diào)，調(diào)節(jié)植物神經(jīng)遞質(zhì)紊亂，緩解更年期癥狀；YFN還能降低尿鈣(Ca)、尿Ca和尿肌酐(Cr)的比值、尿羥脯胺酸(Hyp)和尿Cr的比值、血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的水平，提高血清堿性磷酸酶(ALP)和CT的水平，提示YFN對PMO有防治作用。本研究以PMO

5、經(jīng)典動物模型去勢大鼠為實驗對象，選用各項具有代表意義的指標，觀察YFN對PMO的治療作用，并探討其深層治療機制。 主要內(nèi)容包括：1.YFN對實驗性骨質(zhì)疏松大鼠的藥效學影響；2.YFN對對實驗性骨質(zhì)疏松大鼠的藥理作用機制研究。 方法：1.制備去勢雌性大鼠模型，隨機分為6組：模型對照組、陽性藥對照組、YFN大、中、小劑量組，假手術(shù)對照組。按照相應(yīng)劑量灌服藥物，給藥結(jié)束后，取待測組織檢測。 2.用放射免疫法測定血清性激

6、素含量(按藥盒說明書操作)，全自動生化分析儀分析血清鈣(Ca)、磷(P)、堿性磷酸酶(ALP)含量。用雙能X線骨密度儀測定各實驗組大鼠的骨密度。 3.測量各實驗組大鼠肱骨長度、橫徑及肱骨干重、濕重；采用原子吸收光譜法測定骨礦物質(zhì)Ca，Mg，Zn，Mn含量；用萬能材料試驗機測試骨生物力學指標。 4.制作脫鈣骨組織病理切片，觀察其病理改變并測定骨小梁面積；用免疫組化、免疫熒光和免疫印跡法(westernblotting)檢測

7、ER在各實驗組大鼠骨組織的表達情況。 結(jié)果：1.YFN能明顯提高去勢大鼠體內(nèi)雌激素水平，調(diào)節(jié)體內(nèi)激素水平；使血清Ca含量升高，血P，ALP含量降低；調(diào)節(jié)負鈣平衡和膠原代謝，維持骨吸收和骨重建的正常速率。 2.YFN能使去勢大鼠骨長、寬、干重、濕重增加；增加骨Ca，Mg，Zn，Mn等礦物質(zhì)含量，幫助維持骨鹽代謝平衡，并且密切聯(lián)系骨有機質(zhì)代謝，減緩骨質(zhì)疏松進程。 3.YFN能增強絕經(jīng)后疏松骨質(zhì)的密度，增加骨小梁面積，

8、明顯提高去勢大鼠骨組織生物力學性能，同時提高PMO動物模型骨質(zhì)量和骨生物力學性能，提高骨的承載能力和抵抗外力沖擊的能力。 4.YFN能提高去勢大鼠骨組織內(nèi)ER的表達量，使雌激素作用位點增加，實現(xiàn)雌激素對于骨代謝的保護作用。 結(jié)論：YFN能明顯提高去勢大鼠體內(nèi)雌激素水平；增強絕經(jīng)后疏松骨質(zhì)的密度和骨礦物質(zhì)含量；提高其骨組織雌激素受體的表達量，對PMO有較好的治療作用。其機制不僅是通過增加體內(nèi)雌激素水平，更可以調(diào)節(jié)體內(nèi)微量元