“補腎活血方”對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥影響的實驗研究.pdf

1、目的:
　　研究江蘇省中醫(yī)院骨傷科經(jīng)驗方“補腎活血方”對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效機制。
　　方法:
　　分別基于“補腎活血”方藥治療骨質(zhì)疏松癥隨機對照臨床試驗文獻的系統(tǒng)評價和Meta分析;“補腎活血方”對去卵巢骨質(zhì)疏松癥大鼠模型“高轉(zhuǎn)換型”骨代謝失衡的調(diào)控作用;“補腎活血方”含藥血清對人成骨細胞增殖、分化和礦化能力的干預(yù)作用三個方面，探索“補腎活血”治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效機制。①文獻系統(tǒng)評價和Meta分析:關(guān)鍵詞檢索

2、（補腎、補肝腎、活血、健脾活血、骨質(zhì)疏松癥、臨床試驗、臨床研究），檢索數(shù)據(jù)庫為維普、萬方、中國知網(wǎng)，納入2000年01月-2016年9月時間區(qū)間內(nèi)以補腎活血為法則的方藥治療骨質(zhì)疏松癥的隨機對照臨床試驗。應(yīng)用Review Manager5.3軟件進行Meta分析，所選用主要結(jié)局指標為:主觀癥狀改善、骨密度改變、腰背痛VAS評分改善。通過Meta分析數(shù)據(jù)說明“補腎活血”方藥治療骨質(zhì)疏松癥確有臨床療效;并基于Jadad文獻質(zhì)量評分體系，分析臨

3、床研究存在的不足。②“補腎活血方”對造模大鼠“高轉(zhuǎn)換型”骨代謝失衡的調(diào)控作用:設(shè)立四組動物（空白對照組、模型對照組、治療組、假治療組），每組25只。造模方法為人工手術(shù)去除大鼠雙側(cè)卵巢制作骨質(zhì)疏松癥動物模型，治療組造模2周后開始給藥（補腎活血湯濃縮液灌胃），假治療組給予生理鹽水灌胃。分別于4周、8周、12周每組取5只大鼠經(jīng)中心靜脈取血檢測骨代謝相關(guān)指標:抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、骨堿性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型前膠原N端前

4、肽(PⅠNP)、Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)、Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)、Ⅰ型膠原N末端肽(NTX);第12周中心靜脈取血后麻醉各組大鼠，檢測L2-L6椎體骨密度和骨礦含量。③“補腎活血方”含藥血清對人成骨細胞增殖、分化和礦化能力的干預(yù)作用:取骨質(zhì)疏松癥合并股骨頸骨折患者松質(zhì)骨進行成骨細胞培養(yǎng)，構(gòu)建成骨細胞分化模型;制備低、中、高三種濃度的補腎活血方含藥血清;采用MTT法、細胞上清液堿性磷酸酶測定和茜素紅染色觀察含藥血清對成骨細胞的

5、影響。
　　結(jié)果:
　?、傥墨I系統(tǒng)評價和Meta分析:結(jié)果顯示“補腎活血”方藥治療骨質(zhì)疏松癥在主觀癥狀改善、骨密度提高、疼痛VAS評分改善較對照治療存在優(yōu)效性，但此類臨床研究的隨機化方案設(shè)計、盲法實施等科研方案設(shè)計方面存在不規(guī)范性，需要后續(xù)更嚴謹?shù)拇髽颖尽⒍嘀行?、隨機對照臨床試驗證據(jù)的進一步支持。
　?、趧游飳嶒?造模后4W模型對照組、治療組、假治療組大鼠血清BALP、CTX、NTX和TRACP含量顯著高于空白對照組;

6、造模后8周和12周，模型對照組、假治療組上述指標的增高趨勢仍然維持，而治療組則在第8周和12周出現(xiàn)較模型對照組和假治療組下降的趨勢。模型對照組、治療組、假治療組大鼠血清PⅠCP和PⅠNP水平則在造模后4周較空白對照組顯著下降，造模后8周和12周模型對照組和假治療組的PⅠCP和PⅠNP水平仍然呈下降趨勢，而治療組大鼠的血清PⅠCP和PⅠNP水平則在造模后第8W即出現(xiàn)回升，造模后12W也保持了增高的趨勢，但含量較空白對照組仍較低。
　

7、?、奂毎麑嶒?加入含藥血清干預(yù)細胞生長48h后，MTT檢測顯示中、高劑量組出現(xiàn)不同程度的細胞增殖現(xiàn)象，并存在一定程度的劑量依賴;作用72h后，低、中、高三個劑量組ALP活性增高，高劑量組茜素紅染色鈣鹽沉積明顯增多。
　　結(jié)論:
　　江蘇省中醫(yī)院骨傷科經(jīng)驗方“補腎活血方”對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效與以下作用機制有關(guān):①對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥“高轉(zhuǎn)換型”骨代謝失衡紊亂的調(diào)節(jié)，即對異常增高的骨轉(zhuǎn)換速率起到了抑制性作用;②有提高人成骨細胞