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文檔簡介
1、丁二酸是一種重要的碳四平臺化合物,廣泛應用于食品、醫(yī)藥、表面活性劑、綠色溶劑、生物可降解材料等領域。傳統(tǒng)丁二酸生產(chǎn)方法采用丁烷經(jīng)順丁烯二酸酐通過電解生產(chǎn),因其污染大、成本高而嚴重抑制了丁二酸的發(fā)展?jié)摿?。與傳統(tǒng)化學法相比較,生物合成法采用可再生的生物質資源和溫室氣體二氧化碳為原料,具有不依賴化石原料、能耗低、環(huán)境污染小等諸多優(yōu)點,已成為全球性的研究熱點。目前隨著糧食價格上漲導致以傳統(tǒng)糧食性原料(葡萄糖、淀粉)為碳源厭氧發(fā)酵制備丁二酸的成本
2、較高,不利于生物合成法制備丁二酸的產(chǎn)業(yè)化。若能利用廉價的可再生生物質資源替代葡萄糖、淀粉等糧食性原料,不但可降低其原料成本,而且不會影響糧食安全,對促進生物合成法制備丁二酸產(chǎn)業(yè)化具有重要意義。
本文選用產(chǎn)琥珀酸放線桿菌NJ113為實驗菌株,利用玉米加工廢棄物(玉米皮與玉米芯)為原料厭氧發(fā)酵制備丁二酸,研究內容包括:建立水解糖液中總糖含量的快速檢測方法、玉米加工廢棄物稀酸水解工藝的優(yōu)化、水解糖液的脫毒脫鹽以及利用混合糖液發(fā)酵
3、制備丁二酸,主要研究結果如下:
(1)DNS比色法測定戊糖與己糖的混合糖含量時存在較大誤差,故對DNS比色法進行合理改進。結果表明:采用改進DNS比色法測定玉米加工廢棄物多組分糖液中總糖含量的回收率在98.90%~100.81%之間,RSD=0.71%,明顯提高了DNS法測定混合糖含量的精確度,可用于多組分糖液中總糖含量的定量測定。
(2)對玉米加工廢棄物酸水解制備混合糖液的工藝條件進行研究,以加酸量、物料粒
4、徑、水解溫度和反應時間作為主要考察因素,通過合理正交試驗獲得稀酸水解玉米加工廢棄物的優(yōu)化工藝條件如下:(Ⅰ)玉米皮水解工藝條件為加酸量1%、料液比18%、粒徑20~40目、水解溫度110℃、反應時間90min,該工藝條件下的總糖收率達到92.52%,總糖濃度為85g/L;(Ⅱ)玉米芯水解工藝條件為加酸量1%、料液比20%、粒徑20~40目、水解溫度126℃、反應時間90min,該工藝條件下的總糖收率達到90.11%,總糖濃度為60gg/
5、L。
(3)針對兩種玉米加工廢棄物多組分糖液中各種發(fā)酵抑制物的特點,對其進行脫毒工藝的研究:(Ⅰ)玉米皮多組分糖液精制工藝條件為:活性炭用量1%、pH4.0、反應溫度30℃、反應時間30min,該工藝條件下精制后的糖液呈淺黃透明狀,各種抑制物的去除率依次為:糠醛75.43%、HMF53.63%、酚類化合物98.43%、甲酸4.84%、乙酸10.19%,糖液的脫色率為92.27%,總糖損失率僅為4.1%;(Ⅱ)玉米芯多組分糖
6、液精制工藝條件為:活性炭用量1%、pH4.0、反應溫度30℃、反應時間30min,并經(jīng)3mol/L Ca(OH)2去除硫酸根離子,該工藝條件下精制后的糖液呈無色透明狀,各種抑制物的去除率依次為:糠醛81.76%、HMF70.14%、酚類化合物99.40%、甲酸7.17%、乙酸12.10%、硫酸根離子99.97%,脫色率為97.42%,總糖損失率為12.47%。
(4)以葡萄糖、木糖、阿拉伯糖的混合糖液為底物,考察玉米加工廢
7、棄物多組分糖液中各種抑制物(如糠醛、HMF、甲酸和乙酸)濃度對發(fā)酵制備丁二酸的影響,其外源性添加發(fā)酵抑制物的臨界濃度為:糠醛1.20g/L、HMF1.50g/L、甲酸4.00g/L、乙酸10.00g/L。
(5)利用玉米加工廢棄物精制的多組分糖液替代葡萄糖作為碳源,經(jīng)Actinobacillus succinogenes NJ113厭氧發(fā)酵制備丁二酸:(Ⅰ)經(jīng)活性炭脫毒處理的玉米皮精制多組分糖液可替代葡萄糖作為碳源,當總糖
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