第一部分 喉癌的比較基因組雜交研究;第二部分 SH3GL2基因在喉癌中的表達(dá)研究.pdf

1、喉癌是上呼吸道常見(jiàn)的惡性腫瘤,為人體第6位高發(fā)腫瘤.中國(guó)東北地區(qū)高發(fā),且發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì).與其他人類腫瘤相同,喉癌的發(fā)生和進(jìn)展是一個(gè)包括多種遺傳變化的多步驟過(guò)程,往往伴有染色體的異常,這種非隨機(jī)的異常包括有染色體的丟失、獲得、缺失、重排和異常的復(fù)制、擴(kuò)增等.基因組的不穩(wěn)定導(dǎo)致的癌基因激活、抑癌基因丟失或失活是腫瘤發(fā)生的機(jī)制之一.因此應(yīng)用先進(jìn)的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)尋找其染色體方面的異常以進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)相關(guān)的癌基因和抑癌基因,并研究這些基因在

2、腫瘤形成過(guò)程中的變化,對(duì)了解其起源發(fā)生發(fā)展及其生物學(xué)行為有重要意義.比較基因組雜交(comparative genomic hybridization,CGH)技術(shù)是Kallionimi等于1992年在消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH)和熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)的基礎(chǔ)上建立起的一種分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù),其以實(shí)驗(yàn)

3、方法簡(jiǎn)單,應(yīng)用范圍廣,一次可獲得全基因組DNA水平改變的詳盡資料,而備受人們關(guān)注.由于喉癌研究中遺傳學(xué)資料有限,因此為了探討喉癌的染色體改變,該研究應(yīng)用比較基因組雜交技術(shù)分析了18例喉癌患者,發(fā)現(xiàn)大量的染色體失衡區(qū)域,為闡明喉癌的病因發(fā)病機(jī)理提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù).實(shí)驗(yàn)方法：分別提取腫瘤標(biāo)本和正常人外周血的基因組DNA,然后用缺口平移標(biāo)記上不同顏色(紅或綠)的熒光素,同時(shí)與制備好的正常人外周血淋巴細(xì)胞中期染色體標(biāo)本進(jìn)行原位雜交,雜交后可依據(jù)

4、不同的熒光染料標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè).應(yīng)用裝有冷CCD照相機(jī)的熒光顯微鏡攝取每例喉癌標(biāo)本的熒光染色體圖像,經(jīng)QCGH(Leica公司)軟件分析得到每例喉癌的分析圖.每例標(biāo)本分析至少5個(gè)高質(zhì)量的核型,并將結(jié)果綜合得出該標(biāo)本整套染色體拷貝數(shù)擴(kuò)增或丟失的全貌.結(jié)論：該研究應(yīng)用CGH等方法對(duì)18例喉癌標(biāo)本進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)染色體存在著非隨機(jī)的DNA拷貝數(shù)擴(kuò)增或丟失的位點(diǎn),提示這些位點(diǎn)可能含有候選的原癌基因和抑癌基因.比較基因組雜交技術(shù)用于分析染色體DNA水平的