脈沖染料激光干預(yù)小鼠黃褐斑模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過脈沖染料激光（Pulsed Dye Laser，PDL）干預(yù)治療小鼠黃褐斑動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，檢測(cè)模型皮損區(qū)皮下血管及色素變化情況，探討PDL對(duì)黃褐斑可能的治療意義及作用機(jī)制。
　　方法：健康雌性昆明種小鼠40只，分為兩組，其中30只為模型組，10只為正常組。均剔除其背部毛發(fā)，面積約3*2cm2。模型組予以每日肌肉注射黃體酮（0.4％），5ml/kg體質(zhì)量，同時(shí)以波長(zhǎng)為320nm的中波紫外線照射小鼠裸露皮膚，一日1次,1次60

2、分鐘，共45日，觀察其脫毛部位皮膚變化情況，制作小鼠黃褐斑動(dòng)物模型。建模完成后，取模型組及對(duì)照組小鼠背部皮膚，行組織學(xué)檢查及皮膚丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)模型組皮膚MDA升高和SOD降低，皮膚表皮基底層黑色素增加，驗(yàn)證小鼠黃褐斑模型建立成功。建模成功后，將建模后小鼠分成三組，A組：即對(duì)照組；B組：PDL治療一次組；C組：PDL治療二次組。以PDL干預(yù)治療其背部皮膚，取治療前A組、B組治療后一周、C組治療后一周

3、及 C組治療后一周的對(duì)照組背部皮膚，行組織病理學(xué)檢查，HE染色觀察皮膚的變化，ElivisionTM plus免疫組化方法用HMB45為一抗對(duì)皮膚黑素顆粒進(jìn)行標(biāo)記，CD34為一抗對(duì)皮膚皮下微血管進(jìn)行標(biāo)記。對(duì)比皮膚顏色變化、HE染色法、免疫組化法和圖像分析法觀測(cè)治療前后皮膚血管密度的變化和皮膚黑色素細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)的改變。將資料輸入計(jì)算機(jī)以SPSSl3.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：⑴30只小鼠造模后，

4、27只存活。據(jù)所拍照片實(shí)驗(yàn)區(qū)域皮膚顏色逐漸加深，HMB45免疫組化染色示皮膚黑色素表達(dá)顯著增多；與造模前正常組相比，皮膚組織中SOD明顯降低，MDA升高。⑵以PDL對(duì)小鼠黃褐斑模型皮損區(qū)干預(yù)治療后一周，結(jié)果顯示：與對(duì)照組小鼠相比，小鼠皮下血管密度明顯減少（P<0.05）；與此同時(shí)，激光干預(yù)治療后其皮損區(qū)黑色素的表達(dá)水平也明顯下降（P<0.05）；PDL兩次治療組皮下微血管及黑色素的減少更加明顯。
　　結(jié)論：①雌激素注射并UVB照射