甜菜M14單體附加系附加染色體BIBAC芯片的開發(fā)與應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、在栽培甜菜與野生白花甜菜連續(xù)雜交和回交的過程中,分離得到具有無融合生殖特性的甜菜M14品系,該品系附加有白花甜菜9號染色體,通過對連續(xù)四代甜菜M14品系附加染色體傳遞率分析,發(fā)現(xiàn)該染色體隨母本的傳遞率為97%,子代在形態(tài)上也基本一致,因此把無融合生殖基因或相關(guān)基因定位于附加的白花甜菜9號染色體上。 利用已構(gòu)建的甜菜M14品系的BIBAC文庫篩選出2,377個白花甜菜9號染色體BIBAC克隆,組成9號染色體BIBAC文庫,該文庫平

2、均插入片段為127kb,庫覆蓋白花甜菜9號染色體(80Mb)3.4倍。對這些克隆分別進(jìn)行BIBAC質(zhì)粒DNA的提取等一系列操作,構(gòu)建一種不同于常規(guī)基因芯片的BIBAC芯片,經(jīng)過陽性探針和隨機(jī)引物探針檢測,證明該芯片制備重復(fù)性好、背景噪聲低、雜交信號清晰。 利用已構(gòu)建的BIBAC芯片和甜菜M14與栽培甜菜的花期表達(dá)的mRNA制備的熒光標(biāo)記探針對附加的白花甜菜9號染色體BIBAC文庫進(jìn)行初步表達(dá)分析,來篩選在M14品系胚胎發(fā)育中特異

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