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1、目的:研究酒花黃酮純化工藝,雌激素樣作用以及含量測(cè)定。
方法:采用樹(shù)脂富集方法,分別以酒花黃酮含量和得率為指標(biāo),建立酒花黃酮實(shí)驗(yàn)室制備工藝。建立超高效液相色譜法(UPLC)測(cè)定酒花黃酮提取物中4種黃酮類(lèi)成分含量的方法。以人乳腺癌MCF-7細(xì)胞和去卵巢大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,考察酒花黃酮提取物在體內(nèi)外的雌激素樣作用。
結(jié)果:聚酰胺最適于酒花黃酮的純化,其最佳純化工藝為:精密稱(chēng)取聚酰胺1g,裝入層析柱中,精密移取黃酮濃度為2.2
2、4 mg/mL的供試品溶液10 mL,以1.0 mL/min的流速上樣,洗脫劑為80%甲醇溶液,洗脫體積為8倍柱體積(BV)。酒花黃酮提取物中蕓香苷,紫云英苷,槲皮素和黃腐酚的含量分別為4.57,0.60,1.03和13.28 mg/g,經(jīng)聚酰胺純化后蕓香苷含量較原藥材提高了5.5倍,紫云英苷含量提高5.4倍,槲皮素含量提高了4.1倍,黃腐酚含量提高了6.5倍。酒花黃酮提取物低劑量組和中劑量組隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)能使ER(雌激素受體)陽(yáng)性人
3、乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖(P<0.05);與去卵巢對(duì)照組相比,酒花黃酮高劑量組大鼠的體重,雄激素水平和丙二醛含量減少(P<0.05),臟器系數(shù),雌激素,總抗氧化能力水平均有不同程度的提高(P<0.05),病理學(xué)顯示,酒花黃酮高劑量組子宮內(nèi)膜增厚,子宮腺體增多,子宮肌層變厚。
結(jié)論:在上述純化工藝條件下,酒花黃酮純度為50.05%,得率為32.69%。超高效液相色譜法(UPLC)含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便快速,準(zhǔn)確可靠,重復(fù)性好,可用于酒
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