三尖杉細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化及其動(dòng)力學(xué)初步研究.pdf

1、以大連地區(qū)移栽自廬山植物園的三尖杉(Cephalotaxus)植株為原料，就外植體種類(lèi)、基本培養(yǎng)基種類(lèi)、激素種類(lèi)和濃度等因素對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)、生長(zhǎng)的影響進(jìn)行了系統(tǒng)的研究和歸納，目的是建立和優(yōu)化獲得有效生物堿成分的三尖杉愈傷組織的培養(yǎng)技術(shù)和方法，結(jié)果表明幼莖外植體因其出愈率早、誘導(dǎo)率高而最佳；培養(yǎng)基MS+NAA3.0mg/L+KT0.1mg/L為最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其誘導(dǎo)率達(dá)91％；繼代培養(yǎng)基中一定濃度的NAA(1.0-3.0mg/L)有利于愈

2、傷組織的產(chǎn)生，但是高濃度的NAA(8.0mg/L)則對(duì)愈傷組織的生長(zhǎng)有抑制作用。其在MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基上較在B5和1/2MS培養(yǎng)基上褐化輕，生物量增長(zhǎng)快；冬季誘導(dǎo)的愈傷組織，其誘導(dǎo)率普遍高于夏季所誘導(dǎo)的愈傷組織。利用誘導(dǎo)出的愈傷，成功地建立起了三尖杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系。 研究了三尖杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的動(dòng)力學(xué)規(guī)律，包括細(xì)胞的生長(zhǎng)和碳源、氮源的吸收情況；結(jié)果表明，從培養(yǎng)工藝上看細(xì)胞大致可分為指數(shù)生長(zhǎng)期、恒速生長(zhǎng)期及減速生長(zhǎng)期，培養(yǎng)周期約為30