栗疫病菌群體遺傳結(jié)構(gòu)及其突變菌株的生物學(xué)特征.pdf

1、栗疫病(Chestnut blight)是栗屬(Castanea)植物上最常見、最重要的病害，也是世界著名的森林病害之一。本文對(duì)栗疫病菌的群體結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究。 本研究用標(biāo)準(zhǔn)交配型菌株對(duì)中國(guó)東部11個(gè)省的114個(gè)栗疫病菌進(jìn)行了交配型測(cè)定，結(jié)果表明，只要條件適宜，各種植區(qū)栗疫病菌均可以形成有性階段的子囊殼。本研究克隆了我國(guó)栗疫病菌菌株133和293的MAT-1交配型的部分基因，序列分析表明，133和293菌株與GeneBank的MA

2、T-1的序列同源性為94％和97％。用PCR技術(shù)對(duì)中國(guó)東部栗疫病菌交配型進(jìn)行了快速分子測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MAT-1和MAT-2菌株各占50％，多數(shù)種植區(qū)栗疫病菌同時(shí)存在MAT-1、MAT-2兩種交配型；用分子測(cè)定不同子囊殼栗疫病菌子囊孢子后代的交配型分離情況多數(shù)分離比為1:1。分子測(cè)定與生物學(xué)測(cè)定交配型結(jié)果吻合的有87個(gè)菌株，占75.7％；不吻合的有26株，占22.6％。結(jié)果提示有性雜交導(dǎo)致栗疫病菌的遺傳變異仍然是栗疫病菌遺傳多樣性的重要原

3、因。 采用RAPD方法對(duì)來源于栗疫病菌8個(gè)不同子囊殼的子囊孢子后代和無性生殖的對(duì)照群體各23個(gè)菌株進(jìn)行了群體結(jié)構(gòu)的比較。從RAPD(random amplified DolymorphicDNA)隨機(jī)引物中篩選出擴(kuò)增多態(tài)性豐富的4條引物，共擴(kuò)增出條帶73條，多態(tài)性檢測(cè)率為100％。研究結(jié)果表明，在8個(gè)子囊殼和無性生殖群體中的基因多樣性，64.27％由群體內(nèi)部引起，只有35.73％的多樣性由群體之間的基因差異引起。各子囊殼群體間存

4、在的基因流動(dòng)很小(Nm=0.8994)。有性群體和無性群體之間的遺傳距離為0.1389，基因流動(dòng)值為3.4212，說明子囊殼群體和無性生殖群體之間可能存在一定的關(guān)系。分析表明栗疫病菌子囊孢子后代在自然界的傳播對(duì)自然界病菌的多樣性起重要的作用。 利用紫外誘變方法得到了栗疫病菌的突變體菌株。突變體菌株和初始菌株相比，在生長(zhǎng)速度、產(chǎn)生分生孢子數(shù)量、色素的產(chǎn)生、代謝相關(guān)的酶及致病性上都有明顯的差異。在含有0.5％單寧酸的馬鈴薯培養(yǎng)基(P