血紅蛋白誘導(dǎo)一氧化氮合酶過表達(dá)與一氧化氮生成在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用與意義.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文血紅蛋白誘導(dǎo)一氧化氮合酶過表達(dá)與一氧化氮生成在大鼠腦出血后血腦屏障破壞中的作用與意義HemoglobinInducedNitricOxideSynthaseOverexpressionandNitricOxideProductionContributetoBloodBrainBarrierDisruptionintheRat課題來源：國家自然科學(xué)基金(81271314)廣東省教育部產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項(xiàng)目(201

2、28091100154)學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院楊碩陳祚招副教授外科學(xué)(神經(jīng)外科)學(xué)術(shù)型碩士南方醫(yī)科大學(xué)第It盎床學(xué)院答辯委員會(huì)主席陸永建教授答辯委員會(huì)成員全偉教授牟永告教授李方成教授方陸雄教授論文評閱人牟永告教授汪求精教授2013年4月1O日廣州摘要放和蓄積，且釋放的血紅蛋白可能是導(dǎo)致血腦屏障損傷的重要病理介質(zhì)之一。一氧化氮(Nitricoxide，NO)是體內(nèi)一種重要的調(diào)節(jié)分子，是由一氧化氮合酶(nitri

3、coxidesynthase，NOS)以精氨酸為底物合成的。NOS有三種形式，分別為誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(inducibleNOS，iNOS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialNOS，eNOS)和神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronalNOS，nNOS)。生理狀態(tài)下，NO在脈管系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮著許多重要作用，包括神經(jīng)傳遞的調(diào)節(jié)、局部血流調(diào)節(jié)和參與免疫反應(yīng)。然而，由NOS合成釋放的過量的NO會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的神經(jīng)毒性作用。在急性高

4、血壓、感染、細(xì)菌性腦膜炎和腦缺血中，過量生成的NO會(huì)導(dǎo)致BBB結(jié)構(gòu)和功能的破壞。此外，除了NO自身的毒性作用，它的衍生物特別是過氧硝酸鹽可產(chǎn)生更嚴(yán)重的損傷作用，包括細(xì)胞損傷，興奮性毒性和BBB破壞。目的：本研究通過向大鼠右側(cè)尾狀核內(nèi)注入Hb，檢測不同時(shí)間點(diǎn)周圍腦組織血腦屏障通透性、緊密連接蛋白claudin5、occludin、ZO1、JAM1mRNA的表達(dá)變化、鐵離子蓄積情況、NOS和NO表達(dá)生成變化，探究Hb對血腦屏障結(jié)構(gòu)和功能的影

5、響，并進(jìn)一步分析NOS和NO在此過程中的作用。實(shí)驗(yàn)方法：1、實(shí)驗(yàn)分組及模型制作SPF級(jí)SD成年雄性大鼠230只，體質(zhì)量為250一3009，隨機(jī)分為正常組、Hb組和假手術(shù)組，后兩組按照模型完成后觀察時(shí)間分為6h、12h、24h、48h、3d和7d共6個(gè)亞組。立體定向穿刺大鼠右側(cè)尾狀核，注射20lal血紅蛋白溶液(150g／L)，制作Hb大鼠腦內(nèi)注入模型。假手術(shù)組大鼠在相同位置僅作單純穿刺。2、腦組織石蠟切片制作及HE染色大鼠麻醉后，依次使