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文檔簡介
1、目的:制備TNBS 誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,觀察小鼠潰瘍性結(jié)腸炎早期結(jié)腸不同部位IL-22和IL-22BP的表達(dá)變化,以及腸系膜淋巴結(jié)和小腸派氏集合淋巴結(jié)不同細(xì)胞亞群IL-22的表達(dá)差異。為揭示IL-22在早期潰瘍性結(jié)腸炎中的作用提供依據(jù)。
方法:用2.5% TNBS 誘導(dǎo)C57 小鼠潰瘍性結(jié)腸炎,通過體重測量、結(jié)腸解剖大體觀察和組織切片觀察的方法來評估該模型的有效性;用PCR的方法檢測結(jié)腸不同部位IL-22和IL-2
2、2BP的表達(dá)變化,用免疫組化的方法觀測IL-22的表達(dá)變化;用流式的方法檢測腸系膜淋巴結(jié)和小腸派氏集合淋巴結(jié)CD3-IL-22+和CD3+IL-22+細(xì)胞亞群的比例變化,及CD3-NK1.1hiIL-22+和CD3-NK1.1intIL-22+細(xì)胞比例。
結(jié)果:(1)TNBS 誘導(dǎo)的小鼠IBD模型制備成功。(2)在小鼠潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病早期,模型組與對照組和正常組相比,結(jié)腸潰瘍部位IL-22mRNA水平表達(dá)增加,IL-22B
3、PmRNA水平表達(dá)下降;免疫組織化學(xué)分析,模型組IL-22表達(dá)增多,且局限在受損腸粘膜周圍。正常小鼠盲腸部位的IL-22mRNA水平表達(dá)較結(jié)腸和回腸高,或(和)IL-22BPmRNA水平表達(dá)較結(jié)腸和回腸低。(3)流式細(xì)胞術(shù)檢測模型組小鼠腸系膜淋巴結(jié)IL-22+細(xì)胞比例增加,CD3-IL-22+細(xì)胞增加幅度大于 CD3+IL-22+細(xì)胞。不同組之間腸系膜中的CD3-NK1.1+細(xì)胞無明顯變化,各組CD3-NK1.1+細(xì)胞中,CD3-NK1
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