四川骨髓庫漢族人群HLA-DPB1等位基因的分布及HLA-DPB1在HSCT中錯(cuò)配模式的初步研究.pdf

1、[目的]調(diào)查四川骨髓庫漢族人群HLA-DPB1等位基因多態(tài)性分布情況，估計(jì)四川骨髓庫漢族人群非血緣造血干細(xì)胞移植中可能存在的HLA-DPB1錯(cuò)配情況及錯(cuò)配模式，同時(shí)分析HLA-A，-B，-DRB1全相合的同胞間HLA-DPB1位點(diǎn)存在的錯(cuò)配情況及錯(cuò)配模式。
　　[方法]從四川骨髓庫隨機(jī)抽取1097份四川漢族非血緣造血干細(xì)胞移植捐獻(xiàn)者DNA樣本，從四川省臍帶血造血干細(xì)胞庫和重慶市血液中心臨床移植配型供受者家系中篩選同胞間HLA-A，

2、-B，-DRB1全相合的移植家系901個(gè)。采用PCR-SBT技術(shù)對(duì)DNA樣本進(jìn)行HLA-DPB1測(cè)序分型。經(jīng)ABI3730測(cè)序儀測(cè)序，用uTYPE6.0軟件分析結(jié)果。對(duì)于因第二外顯子區(qū)域內(nèi)的Trans/cis連鎖產(chǎn)生的模棱兩可結(jié)果，設(shè)計(jì)組特異性測(cè)序引物(Group Specific Sequencing Primers，GSSPs)進(jìn)行單等位基因測(cè)序。對(duì)于區(qū)別在第二外顯子外的模棱兩可結(jié)果，以G為后綴表G組，指定分型結(jié)果。用直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)

3、四川骨髓庫漢族人群中HLA-DPB1等位基因的基因頻率;用SPSS19.0軟件對(duì)不同人群HLA-DPB1等位基因分布進(jìn)行X2檢驗(yàn)。采用T細(xì)胞表位(T-cell-epitope，TCE)3/4模型理論推測(cè)四川漢族非血緣造血干細(xì)胞移植供受者之間及HLA-A，-B，-DRB1全相合的同胞之間可能存在的HLA-DPB1等位基因錯(cuò)配模式。
　　[結(jié)果](1)在四川骨髓庫漢族人群中共檢出35種HLA-DPB1等位基因型別，較常見的等位基因及其

4、頻率分別是:HLA-DPB1*05∶01∶01G(gene frequency,GF=40.9％)、*02∶01∶02G(GF=16.1％)、*02∶02(GF=8.4％)、*13∶01∶01G(GF=7.9％)、*04∶01∶01G(GF=6.8％)等，這5種等位基因共占80.1％。35種等位基因中檢出9種美國(guó)組織相容性和免疫遺傳學(xué)協(xié)會(huì)(American Society for Histocompatibility andImmuno

5、genetics，ASHI)常見及確認(rèn)等位基因(Common and Well-Documented，CWD)表中尚不包含的等位基因，分別是:DPB1*41∶01∶01(5例)，DPB1*48∶01(3例)，DPB1*100∶01(3例),DPB1*04∶01∶15、DPB1*25∶01、DPB1*71∶01、DPB1*91∶01、DPB1*93∶01和DPB1*331∶01各1例。還有2例新等位基因，世界衛(wèi)生組織命名委員會(huì)將其分別命名

6、為DPB1*363∶01和DPB1*394∶01。四川骨髓庫漢族人群與廣州漢族人群HLA-DPB1等位基因分布之間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=21.556，P＞0.01)，而與山東漢族(X2=51.134，P＜0.01)及高加索人群(X2=712.92，P＜0.01)之間的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)按照TCE模型對(duì)四川骨髓庫漢族人群HLA-DPB1等位基因進(jìn)行分組，高免疫原性組占2.19％，中等免疫原性組占8.89％，低免疫原性組占

7、88.92％。四川漢族人群中進(jìn)行非血緣造血干細(xì)胞移植時(shí)，根據(jù)TCE模型推測(cè)HLA-DPB1可能存在的允許錯(cuò)配占34.28％，在GvH方向和HvG方向的禁忌錯(cuò)配分別為17.27％，TCE3模型允許而TCE4模型不允許的錯(cuò)配在GvH方向和HvG方向分別為15.59％。(3)移植家系研究中發(fā)現(xiàn)DPB1位點(diǎn)交換率為5.2％。允許錯(cuò)配占交換家系53％;另外47％為禁忌錯(cuò)配。HLA-DPB1禁忌錯(cuò)配在HLA-A，-B，-DRB1全相合的同胞中占2.