山羊精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的實驗研究.pdf

1、精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)是以精子為載體,在受精時將外源目的基因?qū)肼涯讣?xì)胞,是目前轉(zhuǎn)基因動物研究中簡單而高效的方法學(xué)之一.SMGT的核心是高效、穩(wěn)定的體外受精技術(shù)和精子轉(zhuǎn)染技術(shù),前者不僅有利于獲得大量的胚胎來源,而且還對胚胎質(zhì)量以及胚胎移植后的胎兒發(fā)育和動物個體獲得有重要影響,后者是提高轉(zhuǎn)基因動物成功率的關(guān)鍵和保證.由于國內(nèi)外目前在山羊體外受精和精子轉(zhuǎn)染方面的研究尚不成熟,影

2、響了我們即將開展的以精子介導(dǎo)方法為基礎(chǔ)的轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器課題進(jìn)程.為此,該實驗對山羊體外受精技術(shù)和精子轉(zhuǎn)染技術(shù)展開研究,以建立SMGT技術(shù)平臺,為轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器的研制奠定基礎(chǔ).該研究共分為5部分,第一、二、三部分分別就體外受精技術(shù)中的3個關(guān)鍵環(huán)節(jié):卵母細(xì)胞成熟、精子獲能和受精、早期胚胎體外培養(yǎng)進(jìn)行研究,探討體外受精影響因素,優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng),建立穩(wěn)定的體外胚胎生產(chǎn)體系.第四部分對精子供體選擇、外源DNA轉(zhuǎn)染精子的影響因素、