蛹蟲草和多根烏頭的鑒別與化學(xué)成分研究.pdf

1、目的:(1)對蛹蟲草進行性狀鑒別以及發(fā)酵產(chǎn)物提取分離。以期得到結(jié)構(gòu)新穎且活性較好的單體化合物，并對其進行結(jié)構(gòu)鑒定，對某些潛力化合物推測它們的生源途徑，以便通過人工培養(yǎng)或人工合成的方式定向獲得大批量目標(biāo)產(chǎn)物。這些目標(biāo)產(chǎn)物可能是有某些特定功能的物質(zhì)。(2)對多根烏頭進行花粉粒鑒別以及多根烏頭中生物堿進行含量測定，為地產(chǎn)烏頭屬植物藥快速鑒別提供孢粉學(xué)資料，同時也為中藥質(zhì)量控制的發(fā)展研究提供新的思路。
　　方法:(1)選取優(yōu)良蛹蟲草菌種，

2、并對其進行培養(yǎng)條件的優(yōu)選，大批量發(fā)酵后，對其進行代謝產(chǎn)物的分離鑒別。(2)采用掃描電子顯微鏡對花粉粒進行觀察攝像，以及瑞士CAMAG薄層色譜掃描儀進行掃描，使用硅膠G薄層板;展開劑:石油醚∶丙酮(1.5∶1)，加氨水4滴;氯仿∶甲醇(11∶0.55)，加氨水2滴;顯色劑:改良碘化鉍鉀;檢測波長:230nm;狹縫尺寸:2nm x2nm。
　　結(jié)果:(1)蛹蟲草最佳培養(yǎng)條件為:在馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中靜置于28℃光照恒溫培養(yǎng)箱中長至第十

3、三天，以此條件大批量發(fā)酵后，對其進行代謝產(chǎn)物分離，共分離鑒定了15個化合物。其中包括環(huán)肽2個，甾體6個，醚類1個，酯類2個，咯嗪類1個，苯丙吡喃1個，松脂素2個。(2)烏頭屬六種植物花粉形態(tài)的一般特征為:花粉粒橢圓形至細(xì)橢圓形，極面觀三裂三角圓形至三角形，但川烏極面觀呈三裂帶帽三角圓形。六種植物的花粉?？煞譃閮煞N類型:一、花粉粒橢圓形，點狀紋飾，三溝;二、花粉粒細(xì)橢圓形，點狀紋飾，三溝。根據(jù)含量測定的數(shù)據(jù)可知，烏頭堿對照品溶液在濃度0.

4、03-0.3mg/ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，R值:為0.9992;平均回收率(n=9)為104.77％。計算得多根烏頭所含總生物堿達(dá)0.65％，其中烏頭堿0.14％、次烏堿0.10％、3-乙酰烏頭堿0.09％、新烏堿0.02％。
　　結(jié)論:(1)通過對蛹蟲草菌種代謝產(chǎn)物的分離，對于一些活性較好且比較有價值的化合物，我們可以從分子生物方向?qū)ζ溥M行研究，依據(jù)特有的結(jié)構(gòu)特征，進一步推測其生物合成途徑，從基因的方面，對其進行一系

5、列的有效重組以及敲除，以便通過人工培養(yǎng)或人工合成的方式定向獲得大批量目標(biāo)產(chǎn)物，使這些有價值的化合物從質(zhì)到量的放大，從根本上解決了分離單體化合物時所需樣品量大、雜質(zhì)多、過程繁瑣等問題，同時也改善了醫(yī)藥研究中單體化合物緊缺的狀況。(2)烏頭屬植物花粉粒極面觀可作為地產(chǎn)烏頭與川烏的鑒別依據(jù)，但地產(chǎn)烏頭屬植物之間花粉粒形態(tài)沒有明顯不同之處，所以不宜單獨以花粉形態(tài)特征作為區(qū)分依據(jù)。但是，使用掃描薄層法進行樣品含量測定，圖像用以直接觀測并傳達(dá)色譜結(jié)