蛹蟲(chóng)草和多根烏頭的鑒別與化學(xué)成分研究.pdf

1、目的:(1)對(duì)蛹蟲(chóng)草進(jìn)行性狀鑒別以及發(fā)酵產(chǎn)物提取分離。以期得到結(jié)構(gòu)新穎且活性較好的單體化合物，并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，對(duì)某些潛力化合物推測(cè)它們的生源途徑，以便通過(guò)人工培養(yǎng)或人工合成的方式定向獲得大批量目標(biāo)產(chǎn)物。這些目標(biāo)產(chǎn)物可能是有某些特定功能的物質(zhì)。(2)對(duì)多根烏頭進(jìn)行花粉粒鑒別以及多根烏頭中生物堿進(jìn)行含量測(cè)定，為地產(chǎn)烏頭屬植物藥快速鑒別提供孢粉學(xué)資料，同時(shí)也為中藥質(zhì)量控制的發(fā)展研究提供新的思路。
　　方法:(1)選取優(yōu)良蛹蟲(chóng)草菌種，

2、并對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)條件的優(yōu)選，大批量發(fā)酵后，對(duì)其進(jìn)行代謝產(chǎn)物的分離鑒別。(2)采用掃描電子顯微鏡對(duì)花粉粒進(jìn)行觀察攝像，以及瑞士CAMAG薄層色譜掃描儀進(jìn)行掃描，使用硅膠G薄層板;展開(kāi)劑:石油醚∶丙酮(1.5∶1)，加氨水4滴;氯仿∶甲醇(11∶0.55)，加氨水2滴;顯色劑:改良碘化鉍鉀;檢測(cè)波長(zhǎng):230nm;狹縫尺寸:2nm x2nm。
　　結(jié)果:(1)蛹蟲(chóng)草最佳培養(yǎng)條件為:在馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中靜置于28℃光照恒溫培養(yǎng)箱中長(zhǎng)至第十

3、三天，以此條件大批量發(fā)酵后，對(duì)其進(jìn)行代謝產(chǎn)物分離，共分離鑒定了15個(gè)化合物。其中包括環(huán)肽2個(gè)，甾體6個(gè)，醚類(lèi)1個(gè)，酯類(lèi)2個(gè)，咯嗪類(lèi)1個(gè)，苯丙吡喃1個(gè)，松脂素2個(gè)。(2)烏頭屬六種植物花粉形態(tài)的一般特征為:花粉粒橢圓形至細(xì)橢圓形，極面觀三裂三角圓形至三角形，但川烏極面觀呈三裂帶帽三角圓形。六種植物的花粉粒可分為兩種類(lèi)型:一、花粉粒橢圓形，點(diǎn)狀紋飾，三溝;二、花粉粒細(xì)橢圓形，點(diǎn)狀紋飾，三溝。根據(jù)含量測(cè)定的數(shù)據(jù)可知，烏頭堿對(duì)照品溶液在濃度0.

4、03-0.3mg/ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，R值:為0.9992;平均回收率(n=9)為104.77％。計(jì)算得多根烏頭所含總生物堿達(dá)0.65％，其中烏頭堿0.14％、次烏堿0.10％、3-乙酰烏頭堿0.09％、新烏堿0.02％。
　　結(jié)論:(1)通過(guò)對(duì)蛹蟲(chóng)草菌種代謝產(chǎn)物的分離，對(duì)于一些活性較好且比較有價(jià)值的化合物，我們可以從分子生物方向?qū)ζ溥M(jìn)行研究，依據(jù)特有的結(jié)構(gòu)特征，進(jìn)一步推測(cè)其生物合成途徑，從基因的方面，對(duì)其進(jìn)行一系

5、列的有效重組以及敲除，以便通過(guò)人工培養(yǎng)或人工合成的方式定向獲得大批量目標(biāo)產(chǎn)物，使這些有價(jià)值的化合物從質(zhì)到量的放大，從根本上解決了分離單體化合物時(shí)所需樣品量大、雜質(zhì)多、過(guò)程繁瑣等問(wèn)題，同時(shí)也改善了醫(yī)藥研究中單體化合物緊缺的狀況。(2)烏頭屬植物花粉粒極面觀可作為地產(chǎn)烏頭與川烏的鑒別依據(jù)，但地產(chǎn)烏頭屬植物之間花粉粒形態(tài)沒(méi)有明顯不同之處，所以不宜單獨(dú)以花粉形態(tài)特征作為區(qū)分依據(jù)。但是，使用掃描薄層法進(jìn)行樣品含量測(cè)定，圖像用以直接觀測(cè)并傳達(dá)色譜結(jié)