若干枇杷屬植物離體形態(tài)建成及相關研究.pdf

1、枇杷（Eriobotrya japonicaLindl.）為薔薇科蘋果亞科枇杷屬植物，是亞熱帶常綠果樹。我國枇杷種質資源十分豐富，有20個種類（包括種、變種和變型），但只有一個種，即普通枇杷（E. japonicaLindl.）為栽培種。栽培種的離體培養(yǎng)、形態(tài)建成和植株再生已有不少研究；而19個野生種在這些方面卻鮮有研究。因此，開展野生枇杷的離體形態(tài)建成及其相關研究，對于野生種的種質資源離體保存、生物技術育種等方面的研究都具有重要的意義

2、。
　　本研究主要包括三個部分：第一部分是以栽培枇杷品種‘解放鐘’為基礎材料，設計不同的激素組合以及碳源種類對其愈傷組織誘導和愈傷組織再分化誘導的影響，進而將研究范圍擴展到南亞枇杷窄葉變型（南亞窄葉）、廣西枇杷、臺灣枇杷以及本課題組獲得的雜交材料‘解放鐘’枇杷×櫟葉枇杷和‘解放鐘’枇杷×臺灣枇杷；第二部分是從第一部分的結果中選取生長較好的愈傷組織，采用石蠟切片的方法進行組織學觀察，了解枇杷離體形態(tài)建成過程；第三部分是從第一部分中選

3、取生長良好的愈傷組織，利用HPLC測定愈傷組織中蔗糖、葡萄糖和山梨醇的含量，以期獲得可溶性糖與枇杷離體形態(tài)建成關系的基礎資料。得到的主要結果如下：
　?。?）MS+BA0.2 mg/L+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖30 g/L適用于誘導‘解放鐘’枇杷、南亞窄葉、臺灣枇杷、‘解放鐘’枇杷×櫟葉枇杷和‘解放鐘’枇杷×臺灣枇杷組培苗葉片的愈傷組織，除了‘解放鐘’枇杷愈傷誘導率為93.00％，其余的都為100%。

4、而同樣的培養(yǎng)基，對于‘解放鐘’田間植株葉片愈傷誘導率僅為11.00%左右，褐化率卻有89.00%左右。廣西枇杷組培苗葉片在MS+BA0.4 mg/L+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖30 g/L或者MS+BA0.2 mg/L+KT0.4 mg/L+2,4-D1.0mg/L+蔗糖30 g/L這兩種培養(yǎng)基上均可以獲得98.20%左右的愈傷誘導率。
　?。?）‘解放鐘’枇杷、南亞窄葉和廣西枇杷組培苗葉片愈傷誘導過程

5、中，以蔗糖或者山梨醇為碳源的愈傷誘導率比以葡萄糖為碳源的高，而且愈傷組織質量也較好。但愈傷組織的形態(tài)建成能力較低?！夥喷姟咝杂鷤M織在MS+KT3.0 mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30 g/L和MS+KT3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+2,4-D0.1mg/L+蔗糖30 g/L這兩種培養(yǎng)基上可分別獲得2.00%和4.00%的生根率，但生根的愈傷組織不能再分化出芽。而野生枇杷的愈傷組織的褐化率很高，形態(tài)建成能力差。南

6、亞窄葉，廣西枇杷和臺灣枇杷莖段只有在MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30 g/L或NAA0.3 mg/L的培養(yǎng)基上能有一定的形態(tài)建成能力，芽苗數較高和長勢也較好。
　　（3）離體形態(tài)建成的組織學觀察結果顯示：‘解放鐘‘枇杷愈傷組織能形成明顯的擬分生組織、維管結節(jié)以及畸形體胚，南亞窄葉和廣西枇杷愈傷組織大多形成畸形的體胚，這些畸形體胚不能發(fā)育成苗。
　　（4）愈傷組織蔗糖、葡萄糖和山梨醇含量因培養(yǎng)基中附加